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HeLa細胞のライセート化 削除/引用 No.5657-8 - 2017/01/07 (土) 22:13:15 - 大きな木

(無題) 削除/引用 No.5657-7 - 2017/01/07 (土) 21:11:00 - 大きな木 おお様 ご教示ありがとうございます。 一度、スクレーパーでやってみます。 大きな木

(無題) 削除/引用 No.5657-6 - 2017/01/07 (土) 20:54:47 - おお 濃度をきじゅんにすればいいんじゃないでしょうか。全部回収ってWellにも水分がのこるだろうに。

(無題) 削除/引用 No.5657-5 - 2017/01/07 (土) 20:19:21 - 大きな木 説明不足で申し訳ございません。 各ウェルごとの量の差を測定したいので、 ライセートを全量回収したいと考えております。 ですので、ライセートがスクレイパーに付着してしまうとウェル間差を測定し難くなってしまいそうことを懸念しております。

(無題) 削除/引用 No.5657-4 - 2017/01/07 (土) 19:46:48 - おお >スクレーパーなどに付着した量などが気になります。 よくわかりませんが、、、どのように気になるのでしょうか、、、

(無題) 削除/引用 No.5657-3 - 2017/01/07 (土) 17:00:17 - 大きな木 おお様 早速のご教示誠に有難うございます。 ライセートをこの後、色々と定量分析したいと考えております故、 スクレーパーなどに付着した量などが気になります。 できれば、うまく可溶化させる方法を教えて頂けませんでしようか。 大きな木が

(無題) 削除/引用 No.5657-2 - 2017/01/07 (土) 16:35:05 - おお Cell scraperとかでかき取ったらどうでしょうか。

HeLa細胞のライセート化条件 削除/引用 No.5657-1 - 2017/01/07 (土) 09:36:06 - 大きな木 HeLaをSDS(0.8wt% SSC Buffer）で24ウェルプレートでライセート化を試みました。 800rpm x 1Hr 室温で撹拌しましたところ、殆どは可溶化できたのですが、1〜2割程度は細胞の残渣（マトリックスが残っていてこれに付いているような感じです）が培養面に接着したままになっていました。 この後、Hoechst33254を使う予定です。 Triton X100を1％追加するとか、どのような条件できれいに可溶化できますでしょうか。 ご教示のほどよろしくお願い致します。

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