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患者中IgEとECL試薬 トピック削除
No.5873-TOPIC - 2017/03/31 (金) 22:58:26 - こば
これまで長らくウエスタンブロッティングにおける患者血中IgEの検出にアマシャムECL Plusを用いてきました。しかし、販売中止となりECL Advance（販売中止になりましたが）を使い始めましたが、最適化を試みるも何をやっても検出することができません。考えられることは一通りやりましたがダメです。この状態は学内の他の研究室だけではなく、他大学でも起きていて、どこでも何をやっても検出できなくなったと口をそろえて言っています。アマシャムECLが販売されていないので何かしらの試薬を使用しなければなりませんが、どうしようか困っています。もし、IgEの検出でECLを用いている人がいらっしゃったら情報を頂けないでしょうか。また、IgE検出をしていない人でも、ECL plus相当の試薬があれば教えてください（カタログベースではなく、実際に使用した感触で）。宜しくお願いします。
　
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No.5873-5 - 2017/04/21 (金) 06:55:39 - こば
ありがとうございました。

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No.5873-4 - 2017/04/20 (木) 22:01:57 - こば
くぁwせdrちゅい０−さん、おおさん、ありがとうございます。いただいた情報を元に検討してみます。今年は研究費がとてなかったので、GEは厳しいかも。

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No.5873-3 - 2017/04/01 (土) 02:35:59 - おお
Lumigenという会社が（旧）Amersham の ECL plusとおなじ基質（PS-3）を使っています。ECL Advanceはこの会社のTMA-3かTMA-6を使っていたかと思います。
www.lumigen.com/products/western-blotting/lumigen-ecl-plus-ps-3

GEのECL primeはECL plus以上の感度がありAdvanceよりバックグランドのコントロールがしやすいように感じます。
www.gelifesciences.com/webapp/wcs/stores/servlet/productById/en/GELifeSciences-us/28980926

わたしはMilliporeのLuminata Forteをつかっています。Crescendoと同じぐらいかなと思ったんですが、いかのURLではそれより強いですね。１年間持つということなので昔のECL plus （たしか２ー３ヶ月しか持たなかった）よりは使い勝手がいいです。感触ではECL plus相当と思っています。
www.emdmillipore.com/US/en/product/%E3%83%A1%E3%83%AB%E3%82%AF%E3%83%9F%E3%83%AA%E3%83%9D%E3%82%A2%E3%81%E3%82%A6%E3%82%A7%E3%82%B9%E3%82%BF%E3%83%B3%E3%83%96%E3%83%AD%E3%83%83%E3%83%86%E3%82%A3%E3%83%B3%E3%82%B0%E7%94%A8%E8%A9%A6%E8%96%AC,MM_NF-C72652

(無題) 削除/引用
No.5873-2 - 2017/03/31 (金) 23:53:28 - くぁwせdrちゅい０−
ECLアドバンスだけは確か専用のブロッキング剤があって（kitで付いてたもので別売りじゃなかったようにおもう）、これ使うように、みたいな感じだった記憶があるというか今調べたらそうだった。なのでそのブロッキング剤まだ売ってますかor代替品ありますかって会社に聞いてみたら。てかselect使ってきてこれは感度的にも高くてでもバックグラウンドはきれいでいい感じでデータでてます。

患者中IgEとECL試薬 削除/引用
No.5873-1 - 2017/03/31 (金) 22:58:26 - こば
これまで長らくウエスタンブロッティングにおける患者血中IgEの検出にアマシャムECL Plusを用いてきました。しかし、販売中止となりECL Advance（販売中止になりましたが）を使い始めましたが、最適化を試みるも何をやっても検出することができません。考えられることは一通りやりましたがダメです。この状態は学内の他の研究室だけではなく、他大学でも起きていて、どこでも何をやっても検出できなくなったと口をそろえて言っています。アマシャムECLが販売されていないので何かしらの試薬を使用しなければなりませんが、どうしようか困っています。もし、IgEの検出でECLを用いている人がいらっしゃったら情報を頂けないでしょうか。また、IgE検出をしていない人でも、ECL plus相当の試薬があれば教えてください（カタログベースではなく、実際に使用した感触で）。宜しくお願いします。
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