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活性測定のΔO.D/min トピック削除
No.6358-TOPIC - 2017/10/02 (月) 23:25:33 - mai
授業で、酵素活性のΔO.D/minを算出すれば、Vmaxが導けると習いました。
Lineweaver Burkeプロットに各基質濃度のΔO.D/minを当てはめれば、Kmの値が算出できることは理解できました。
しかし、Vmaxが、定数になる理由がわかりません。酵素濃度に比例しないのでしょうか?こ
また、このとき算出されるVmaxの単位はどのような単位になるのでしょうか。調べたら、Vmaxの単位は、uM/minとありましたが、このような単位になる要素が見当たりません。

初歩的な質問かもしれませんが、調べてもどうしてもわかりませんでした。
お時間がありましたら、アドバイスを頂けたら有難いです。
 
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Vmaxの単位について 削除/引用
No.6358-6 - 2017/10/03 (火) 17:21:43 - mai


丁寧な説明ありがとうございます。
教科書をもうすこし眺めて、理解したいとおもいます。
それでも、わからなければ、先生に聞きに行こうと思います。

お返事を下さった皆様、ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.6358-5 - 2017/10/03 (火) 17:14:49 - TS
ここで聞いてはいけないとは言いませんが、
授業や課題について、自分で勉強してもわからないなら、
担当教員に聞きに行くのが良いのではないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.6358-4 - 2017/10/03 (火) 15:36:09 - シーケンス
生化学の教科書でミカエリスメンテンの式の項目を熟読したほうが
手っ取りはやいです。式を何回も模写して,しっかりと手を動かして理解する・・・


単位について疑問に感じているようですが,
単位のスケールはmMだろうがµMだろうが関係ありません。
換算すれば全部同じになるんで・・・


まずは,ミカエリスメンテンの式の意味をしっかりと理解すること・・・
最大反応速度Vmaxは「基質量が十分な時」は確かに比例します。
反応系の酵素がすべて反応しているとき(最大反応速度の時)
酵素基質複合体と酵素の濃度は一致して次式がなりたち

Vmax=kcat{ES}=kcat{E}

が成り立つ。
kcatは触媒定数であり,酵素の触媒能として評価できる。
この式だけを見るとVmaxは定数ではない・・・
ただ,Lineweaver Burkeプロットを作るときには
酵素量は一定にするので,(結果的に)Vmaxは一定の値をとるのです。
基質濃度のみを変えて,Km,Vmaxを算出するのです。


補足ですが,
酵素の精製をしているときなんか,
酵素量を最大反応速度(一定時間内での反応量)で
評価しています。

Vmaxの単位について 削除/引用
No.6358-3 - 2017/10/03 (火) 12:19:58 - mai
お返事ありがとうございます。

Vmaxの単位は調べると、(m)M/minとありました。
Lineweaver Burkeから算出される、VmaxはV/minのような気がするのですが、このV/minを(m)M/minにする方法がいまいちわかりません。可能ならば、アドバイスを頂きたいです。


基礎が理解できていないので、このような初歩的な質問をしてしまい申し訳ないです。

(無題) 削除/引用
No.6358-2 - 2017/10/03 (火) 08:50:15 - cDNA
課題ということなので、
教科書、または複数のサイトでVmaxの単位を調べて見ては如何でしょうか。今、気にしている懸念はもっともです。

活性測定のΔO.D/min 削除/引用
No.6358-1 - 2017/10/02 (月) 23:25:33 - mai
授業で、酵素活性のΔO.D/minを算出すれば、Vmaxが導けると習いました。
Lineweaver Burkeプロットに各基質濃度のΔO.D/minを当てはめれば、Kmの値が算出できることは理解できました。
しかし、Vmaxが、定数になる理由がわかりません。酵素濃度に比例しないのでしょうか?こ
また、このとき算出されるVmaxの単位はどのような単位になるのでしょうか。調べたら、Vmaxの単位は、uM/minとありましたが、このような単位になる要素が見当たりません。

初歩的な質問かもしれませんが、調べてもどうしてもわかりませんでした。
お時間がありましたら、アドバイスを頂けたら有難いです。

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