Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

ChIP用の5 M LiClのストック溶液について トピック削除
No.6380-TOPIC - 2017/10/10 (火) 11:27:15 - ChIP
お世話になります。ChIPを始めたばかりの者です。

LiClで洗浄する際のready to useの溶液は使用後、残りの溶液が固形化していることに気がつきました。
そこで5Mのストック溶液から直前調製すべきかと推察します。

お聞きしたいのは、この5Mのストック水溶液も直前調製した方がよいのでしょうか?
私は2週間前に調製し、それを室温で置いたものが手元にありますが、再度調製し直した方がいいのでしょうか?
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



8件 ( 1 〜 8 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.6380-8 - 2017/10/11 (水) 11:38:04 - おお
あ、SDCだからナトリウム塩だね。。。

(無題) 削除/引用
No.6380-7 - 2017/10/11 (水) 09:38:22 -
#No.6380-5 固体(誤)固形(適)
#横からレスしてしかも誤記ですみません

ChIPさん、LiCl Wash Bufferを調製したとき、使用したとき、溶解しきっていましたでしょうか? 手順もできれば教えてください。

(無題) 削除/引用
No.6380-6 - 2017/10/11 (水) 03:07:51 - おお
5 M LiCl自体が固化したような書き方だったんですが違ったんですか?
SDCと書かれてますがそれが原因の可能性があるかもしれません。酸性寄りになるとSDCは沈殿しやすいです。その溶液のpHを確認してください。Sodium Deoxycholate Na塩をつかうか、Wash bufferを作る際にpHを合わすか(pH8のTris-HClを使わずに)、Trisの濃度をあげるか、Sodium Deoxycholate 10%を作るときpHを7以上にちょうせいするか。Sodium Deoxycholate 10%も沈殿を生じやすいです。

(無題) 削除/引用
No.6380-5 - 2017/10/10 (火) 21:07:53 -
ストック溶液として 5M LiClと10% Sodium Deoxycholate(W/V) を作って室温保存,用時に混合して最終的な溶液組成にしています。固体化,どうしてでしょうね。混ぜる順序はどうですか。滅菌水を先にして,LiClが希釈された状態で10% Sodium Deoxycholate(W/V)などを加えていきます。高濃度のストック溶液を接触させると固まりますね。

(無題) 削除/引用
No.6380-4 - 2017/10/10 (火) 19:56:26 - ChIP
https://www.researchgate.net/post/Why_does_LiCl_ChIP_wash_buffer_turns_into_gel_at_4C

固形化する人もいるみたいです。
ただSDSが原因とは思えないです。私は室温で使用していますし。

(無題) 削除/引用
No.6380-3 - 2017/10/10 (火) 19:29:21 - ChIP
おおさん、

え?そうなんですか?
これまで4回ほどChIPをしてきましたが、全ての回において固体化しています。

LiCl Wash Buffer
0.25 M LiCl
1% Sodium Deoxycholate
1 mM EDTA
10 mM Tris-HCl pH 8.0

これが組成です。
SDCは粉末を直接使っています。

最初の質問に戻りますが、おおさんは5M LiClは用事調製でしょうか?
そうでないのなら、室温で長期保存は可能でしょうか?
SDCもストック溶液を作るとしたら何%が都合がいいでしょうか?
固形化しないと聞いて今不安になっています。



>[Re:2] おおさんは書きました :
> そんなこと起こったことがないので、なんかその溶液が変だったんじゃない?

(無題) 削除/引用
No.6380-2 - 2017/10/10 (火) 17:49:00 - おお
そんなこと起こったことがないので、なんかその溶液が変だったんじゃない?

ChIP用の5 M LiClのストック溶液について 削除/引用
No.6380-1 - 2017/10/10 (火) 11:27:15 - ChIP
お世話になります。ChIPを始めたばかりの者です。

LiClで洗浄する際のready to useの溶液は使用後、残りの溶液が固形化していることに気がつきました。
そこで5Mのストック溶液から直前調製すべきかと推察します。

お聞きしたいのは、この5Mのストック水溶液も直前調製した方がよいのでしょうか?
私は2週間前に調製し、それを室温で置いたものが手元にありますが、再度調製し直した方がいいのでしょうか?

8件 ( 1 〜 8 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。