Bio Technical フォーラム

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アポトーシス細胞 定量化 トピック削除
No.7304-TOPIC - 2018/10/10 (水) 15:06:49 - qwpo
実験で細胞にとある刺激を与えることによりアポトーシスが起こっているかについて調べることになりました.
文献等を調べるとTUNEL法とAnnexin-V/PI法の二つが多く用いられていると思いますが,現在Annexin-V/PI法を採用することを考えています.ただ,現在フローサイトメーターは所有していないため,定量化についてほかの方法がないか検討しています.
Annexin-v/PI法に限らず,定量化はフローサイトメーターを用いる方法しかないのでしょうか.


初歩的な質問で申し訳ありません.
宜しくお願い致します.
 
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染色で顕微鏡 削除/引用
No.7304-3 - 2018/10/11 (木) 17:20:04 - ema
https://www.essenbioscience.com/ja/applications/cell-health-viability/apoptosis/
どれくらいの細胞数でカウントしたいかによります。
大量ならフローサイトでなければ処理し切れませんが、そこまでの数がいらないなら画像取得してカウントするような試薬は色々あります。
ImageJか組織解析用のソフトで解析してはいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.7304-2 - 2018/10/10 (水) 15:24:45 - おお
定量化と簡単に言うけど、数が知りたいのかなどいろいろと評価したいもので方法論が多少変わってこないかな。

生化学的には活性化カスペースの量や活性というのもやれないことはない。またその下流のきしつの断片化なんかも見ている場合があるし・

PIのようなDyeなら顕微鏡下でも見れるし。

かなりラフなやりかたならコメットアッセイみたいなものもあるし。

アポトーシスといってもどの程度の定義でいいのかでも選択肢が変わるだろうし。

アポトーシス細胞 定量化 削除/引用
No.7304-1 - 2018/10/10 (水) 15:06:49 - qwpo
実験で細胞にとある刺激を与えることによりアポトーシスが起こっているかについて調べることになりました.
文献等を調べるとTUNEL法とAnnexin-V/PI法の二つが多く用いられていると思いますが,現在Annexin-V/PI法を採用することを考えています.ただ,現在フローサイトメーターは所有していないため,定量化についてほかの方法がないか検討しています.
Annexin-v/PI法に限らず,定量化はフローサイトメーターを用いる方法しかないのでしょうか.


初歩的な質問で申し訳ありません.
宜しくお願い致します.

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