Bio Technical フォーラム

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ヒト心室組織蛍光染色でDAPIが染まらない トピック削除
No.7964-TOPIC - 2019/06/07 (金) 16:55:37 - Y.O.
ヒト左室組織の蛍光染色を行っているものです。

核染色として、DAPI(VECTASHIELD, H-1200, VEC)を使用しておりますが、全く染色されません。同じ液でH9c2細胞を染色すると核がしっかり染まるため、商品の問題ではないと思っております。細胞の種類と関係なく全く染まらない状況です。

どなたかお詳しい方、ご教授いただければ幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.7964-4 - 2019/06/07 (金) 19:36:18 - あ
和光とかの安いdapiを買って、PBSなど好きなバッファで希釈して
使用

濃度は、あちこちの論文見て。

(無題) 削除/引用
No.7964-3 - 2019/06/07 (金) 17:31:07 - Y.O.
ありがとうございます!
PBSで2倍くらいに薄めればいいでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.7964-2 - 2019/06/07 (金) 17:22:56 - g
まず、PBS/DAPIで染めるといけるかも。
vectashieldはグリセロールが入っているから、粘性が高く組織サンプルの場合、浸透が悪い場合がある。

ヒト心室組織蛍光染色でDAPIが染まらない 削除/引用
No.7964-1 - 2019/06/07 (金) 16:55:37 - Y.O.
ヒト左室組織の蛍光染色を行っているものです。

核染色として、DAPI(VECTASHIELD, H-1200, VEC)を使用しておりますが、全く染色されません。同じ液でH9c2細胞を染色すると核がしっかり染まるため、商品の問題ではないと思っております。細胞の種類と関係なく全く染まらない状況です。

どなたかお詳しい方、ご教授いただければ幸いです。

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