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(無題) 削除/引用 No.8739-4 - 2020/04/01 (水) 09:54:21 - asan 反応に界面活性剤を入れ忘れたとか？ ウエスタンのブロッキングぐらいなら多少グレードが低いものを使ってもそこまで変わらないと思いますけど。 一応、脂肪酸がない方がバックはへるとのことですが、真っ黒になるということは根本的に何かをミスってる気がします。 https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/SAJ/Brochure/1/j_recipebsa.pdf

(無題) 削除/引用 No.8739-3 - 2020/03/28 (土) 20:13:17 - blocking 早速のご返信ありがとうございます、冷蔵庫で昨日見つけたのは乾燥粉末で見た目はまだあまり使ってなくて新しい感じで微生物で汚染してるようには見えなかったのですがそう見えるだけで本当は古いかもしれないので月曜日にいつ買ったか知ってる人いるかどうか聞いてみます、とりあえず抗体関係は前のBSAではつい最近までいい感じでシグナルが見えていてBGも綺麗だったのでこれはBSAがアレかと思い聞きました、気になるのは溶液の色がなんとなく褐色というか今までのBSAより変に濃かったことで精製で除けなかったヘモグロビンかとも思いましたがわかりません、

(無題) 削除/引用 No.8739-2 - 2020/03/28 (土) 19:22:24 - AP カビとか細菌とかが棲息していて、微生物由来のperoxidase 活性に反応したとか？ ブロッキングだけで抗体なしでも光ったりしないか？

albumin変えたらblockingが変になった件 削除/引用 No.8739-1 - 2020/03/28 (土) 18:36:17 - blocking ウェスタンやっててブロッキングをしようと思ったらいつも使ってるalbuminがなくなっててそれで冷蔵庫探してたら違うメーカーの高いalbumin見つけたのでまあいいかこれでもと思いこれ使ったらなんかバックグラウンドがものすごいきたないというかほぼまっ黒になってしましましたがそういうことは普通にありますかどちらもコーンのEtOH分画してて高純度です。来週またします。

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