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BL21のプロテアーゼ発現について トピック削除
No.9284-TOPIC - 2020/11/06 (金) 12:39:07 - 初心者
BL21はプロテアーゼ遺伝子が欠損していると思うのですが、タンパク質精製の際プロテアーゼ阻害剤を添加するのはなぜですか?
まだ勉強を始めたばかりの初心者ですので教えていただけると幸いです
 
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No.9284-7 - 2020/11/08 (日) 23:44:03 -
要はプロテアーゼ欠損を謳っているとはいえ、阻害剤を入れておかないと分解されてしまう(少なくともそれが気になる実験が多い)程度には多種のプロテアーゼを有しているということです。

メーカーのカタログ情報だけ見てしまうと初心者には素敵な株に見えてしまうかもしれませんがそんなことはないんですね

もちろん阻害剤にも特性があり、入れるだけで万事OKにはなりませんのでご注意を

(無題) 削除/引用
No.9284-6 - 2020/11/06 (金) 13:35:02 - あ
まあ研究が多少できるなんJ民みたいなもんだし民度はクソカスやろなあ

(無題) 削除/引用
No.9284-5 - 2020/11/06 (金) 13:31:33 - f
こらこら、そんなに初心者を責めるものではありません。

「お前、そんなのも知らないのか」、的なコメントは相手を不快にさせるだけですよ。

(無題) 削除/引用
No.9284-4 - 2020/11/06 (金) 13:28:19 - G25
BL21が遺伝的に欠損しているのはlonとompTという2つのプロテアーゼだけですよ。大腸菌は少なくとも50個くらいの異なるプロテアーゼをもっています。いったい、一個の生物が一個や二個のプロテアーゼしか持っていないと思いますか? 内在性のプロテアーゼが一切存在しないで、生きていける生物がありますか?

活性の比較的高いプロテアーゼで大腸菌の生存や増殖に重篤な影響を及ぼさないで欠損できるもの、それがlonとompTだったということでしょう。

(無題) 削除/引用
No.9284-3 - 2020/11/06 (金) 13:25:52 - おお
https://www.annualreviews.org/doi/10.1146/annurev.genet.30.1.465?url_ver=Z39.88-2003&rfr_id=ori%3Arid%3Acrossref.org&rfr_dat=cr_pub++0pubmed

(無題) 削除/引用
No.9284-2 - 2020/11/06 (金) 13:05:38 - GOH
そういうことは背景も含めて成書で勉強された方が良いと思います。
プロテアーゼを持たない大腸菌が生きていけるでしょうか?

BL21のプロテアーゼ発現について 削除/引用
No.9284-1 - 2020/11/06 (金) 12:39:07 - 初心者
BL21はプロテアーゼ遺伝子が欠損していると思うのですが、タンパク質精製の際プロテアーゼ阻害剤を添加するのはなぜですか?
まだ勉強を始めたばかりの初心者ですので教えていただけると幸いです

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