Bio Technical フォーラム

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蛍光強度の測定波長について トピック削除
No.9593-TOPIC - 2021/03/24 (水) 12:26:27 - 初心者の助
はじめまして。
Bodipy cholesterolの蛍光強度測定を行いたいと考えております。

Bodipy 自体は Ex480・Em508nmでございますが、蛍光強度測定機器が

485/Em 530のフィルターしかございません。

Emの波長が22nmも離れておりますと,やはり測定値に大きな誤差が出るものでし

ょうか? 何卒ご教示程よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.9593-4 - 2021/03/24 (水) 22:06:41 - トランス
よっぽど暗くない限り大丈夫だと思います。

半値幅の話もそのとおりだし、長波長側にずれたフィルターは
多くの場合は大丈夫。

富士山のような両方の裾野が均等な形ではなく、長波長側に長い
裾野の形だから。

(無題) 削除/引用
No.9593-3 - 2021/03/24 (水) 13:42:14 - おお
https://www.intechopen.com/books/bodipy-dyes-a-privilege-molecular-scaffold-with-tunable-properties/introductory-chapter-bodipy-dye-an-all-in-one-molecular-scaffold-for-bio-photonics

これを見る限り大丈夫そうだけど。

(無題) 削除/引用
No.9593-2 - 2021/03/24 (水) 13:11:48 - G25
強度(測定値)は下がるけど、相対的なものであって「誤差」ではないな。

ご存知とは思うけれど、光学フィルターの仕様にはピークの波長(例えばEm 530 nm)という特性の他に半値幅というのがある(20 nmとか)。ピーク波長からどれだけ離れたときに強度が1/2になるかという特性です。508 nmの光を、530 nm半値幅20 nmのフィルターでみると強度は1/2弱になるってこと。

蛍光強度の測定波長について 削除/引用
No.9593-1 - 2021/03/24 (水) 12:26:27 - 初心者の助
はじめまして。
Bodipy cholesterolの蛍光強度測定を行いたいと考えております。

Bodipy 自体は Ex480・Em508nmでございますが、蛍光強度測定機器が

485/Em 530のフィルターしかございません。

Emの波長が22nmも離れておりますと,やはり測定値に大きな誤差が出るものでし

ょうか? 何卒ご教示程よろしくお願い致します。

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