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(無題) 削除/引用 No.2735-3 - 2010/06/18 (金) 09:21:53 - あき 参考文献をご紹介いただきありがとうございました。クロスリンクは抗体の使用量が多いので躊躇しておりましたが、十分トライしてみる価値がありそうですね。実際に実験を行った際には、結果のご報告をさせていただきます。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.2735-2 - 2010/06/18 (金) 05:47:02 - そう考えている。 この論文のmethodにprotein A-DynabeadsにDMP使ってIgGくっ付けるやり方でてる。 http://www.jci.org/articles/view/23475 protein Gでも同じと思う。というかdynabeadsだから何か特別とかという事でなくて、よく知られているDMPによるimmobilisationの一般的な方法でやっていいとおもう。dynabeadsは使った事なくて、他のタイプのprotein A or G ビーズだけどいままでDMPによるIgG固定化で不都合起きた事ない。IP問題なくいけてる。でも架橋率は100%でないから、どうしても少しは漏れるのでWBとかするとHとLのシグナルはあるていど出てしまう。これはしょうがない。もちろんしないときよりはずっと少ないけど。

DynabeadsのCrosslinking regentについて 削除/引用 No.2735-1 - 2010/06/16 (水) 23:27:50 - あき Dynabeads Protein Gを用いてIPしたサンプルをNuPAGE Bis Tris gel (Invitrogen)で電気泳動しています。抗体のCrosslinkingにはBS３が推奨されていますが私どもの手元にありません、もしSodium borate+DMPを使って成功された方がいらっしゃいましたらぜひプロトコールを教えてください。よろしくお願いします。

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