Bio Technical フォーラム

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実験をどこで止めるか？ トピック削除
No.107-TOPIC - 2009/02/27 (金) 12:49:28 - ものぐさ太郎
マウスのリンパ球を使って実験しています
（脾臓と肝臓です）
リンパ球の表面マーカーと細胞内サイトカインの染色をしています
サイトカイン染色の際にPMA/Ionomycineで6時間刺激するのですが、当日にやるとどれだけ急いでも真夜中になってしまいます。できるだけ新鮮なうちにやるのがいいのは重々承知ですが、4度で保存しておいて次の日の朝から刺激を入れ始めるのはアリなんでしょうか？
　
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No.107-4 - 2009/02/28 (土) 08:46:33 - ものぐさ太郎
つまらない質問にもかかわらず、丁寧に答えてくださりありがとうございました
あきらめて（？）がんばります

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No.107-3 - 2009/02/27 (金) 19:32:39 - ami
固定しちまえば止めておけますが、あまりおすすめはしないです。
次の日から刺激は絶対やめた方がいいです。かなり死にます。

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No.107-2 - 2009/02/27 (金) 15:15:13 - DC
細胞内染色の際に、PFA固定の段階でストップできますよ！
もしくは、細胞内染色まで完全に終わらせてしまって、FACSバッファーでチューブを満たしておけばO/Nは可能です。
私はそれでデータがぶれるのがあまり好きじゃないので夜中になってもその日のうちにFACSまで行ってしまいますが・・・

実験をどこで止めるか？ 削除/引用
No.107-1 - 2009/02/27 (金) 12:49:28 - ものぐさ太郎
マウスのリンパ球を使って実験しています
（脾臓と肝臓です）
リンパ球の表面マーカーと細胞内サイトカインの染色をしています
サイトカイン染色の際にPMA/Ionomycineで6時間刺激するのですが、当日にやるとどれだけ急いでも真夜中になってしまいます。できるだけ新鮮なうちにやるのがいいのは重々承知ですが、4度で保存しておいて次の日の朝から刺激を入れ始めるのはアリなんでしょうか？
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