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HeLa細胞でのコロニー形成 トピック削除
No.1197-TOPIC - 2009/09/14 (月) 16:04:31 - みこまち
いつも参考にさせて頂いております。

初歩的な質問ですみません。

HeLa細胞(親株)でのコロニー形成能について教えてください。
私どもの研究室にあるHeLa細胞はATCCから購入したものです。
コロニー形成(軟寒天ではなく通常のコロニー形成)を行ったところうまくいきません。
播種する細胞数や培地を変えてみたのですがだめでした。
(1週間くらいはコロニーを作っているようでした(観察用にdishを多めに作って観察しました)が日数が経過するとはがれてきてしまいました)

やはり親株ではコロニー形成は難しいのでしょうか?
バンクなどに売っている亜株のHeLa S3というコロニー形成能が高い細胞株でないとだめでしょうか?

それとも私たちの研究室にある細胞が変異してしまっているのかと思ったりしています。

何でもいいので情報交換して頂けると幸いです。

よろしくお願いします。
 
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ありがとうございました。 解決済み 削除/引用
No.1197-7 - 2009/09/24 (木) 12:16:00 - みこまち
みなさまありがとうございました。
〆ます。

培地交換 削除/引用
No.1197-6 - 2009/09/15 (火) 11:34:53 - みこまち
きれいなコロニー様

確かに培地交換は有効に思います。
やってみようと思います。

でもHeLaってそんなにやっかいな細胞でしたっけ?
文献検索などするとコロニーは簡単に出来そうに思えるのですが、、
きれいなコロニー様の使っていらっしゃる細胞も問題なく出来ていらっしゃるようですし。。。

知り合いにHeLaを使っている方がいて聞いてみたところ、そこのラボのHeLaも特に問題なく2週間でコロニーが出来るようです。

HeLaは世界中に出回っているので株によって(ラボによって)かなり性質が変わっているんでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.1197-5 - 2009/09/15 (火) 07:57:05 - きれいなコロニー
死に始めるまえにフレッシュな培地と交換してみてください。培地の種類は、ふつうに生育している限り関係ないでしょう。

すみません 削除/引用
No.1197-4 - 2009/09/14 (月) 22:12:42 - みこまち
きれいなコロニー様

お返事ありがとうございます。
DMEMですか。
RPMIでおこなったところ1週間目までは順調に出来てたようなのですが10日ごろから弱って(死に始めました)きました。

播種した細胞数は100〜300cells/dish(6cm)
なので細胞数が多すぎるということはないと思います。

S3は浮遊もありましたがコロニー系性能が高いというのもあったような?もう一度調べてみます。


通りがかり様
すみません。急いで解答が欲しかったのですがレスがつかないので削除せずに別のサイトにも質問してしまいました。このことを「マルチポスト」というのですね。このような掲示板初心者なので失礼なことをして失礼しました。ご指摘ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.1197-3 - 2009/09/14 (月) 21:01:53 - 通りすがり
マルチポストはいけない。

http://oshiete1.goo.ne.jp/qa5289744.html

(無題) 削除/引用
No.1197-2 - 2009/09/14 (月) 20:54:53 - きれいなコロニー
とくに問題ありませんが。きれいなコロニーを作ります。DMEM10%serumで。

はがれてくるというのは、死に始めてということですか?それなら培地を変えます。強い細胞ですので、蒔きすぎて養分が不足しないかぎり、コンフルエントになるまで増殖すると思います。


>バンクなどに売っている亜株のHeLa S3というコロニー形成能が高い細胞株でないとだめでしょうか?

S3は浮遊型ではなかったでしょうか?むしろ向かないのでは?

HeLa細胞でのコロニー形成 削除/引用
No.1197-1 - 2009/09/14 (月) 16:04:31 - みこまち
いつも参考にさせて頂いております。

初歩的な質問ですみません。

HeLa細胞(親株)でのコロニー形成能について教えてください。
私どもの研究室にあるHeLa細胞はATCCから購入したものです。
コロニー形成(軟寒天ではなく通常のコロニー形成)を行ったところうまくいきません。
播種する細胞数や培地を変えてみたのですがだめでした。
(1週間くらいはコロニーを作っているようでした(観察用にdishを多めに作って観察しました)が日数が経過するとはがれてきてしまいました)

やはり親株ではコロニー形成は難しいのでしょうか?
バンクなどに売っている亜株のHeLa S3というコロニー形成能が高い細胞株でないとだめでしょうか?

それとも私たちの研究室にある細胞が変異してしまっているのかと思ったりしています。

何でもいいので情報交換して頂けると幸いです。

よろしくお願いします。

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