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細胞表面の染色 トピック削除
No.179-TOPIC - 2009/03/13 (金) 04:19:41 - 染色
いくつかの組織(パラフィン切片)の免疫染色をしていますが、先日軟骨の染色を行ったところ、細胞がみられませんでした。たくさんの小さな穴の中に期待していた細胞が全くありませんでした。細胞表面のたんぱくをみたかっただけに、残念です。何が原因でしょうか?知人は、固定以降の有機溶媒が原因か?などといっていますが、どうでしょうか?これを防いで、細胞の表面をうまく染色には、どのような方法がよいでしょうか?ご指導いただけると助かります。よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.179-2 - 2009/03/13 (金) 07:34:59 - CJ
まず確認したいこととして、同一条件下で他の組織の染まるべき細胞は染まりますか?もしそうでないなら、抗体がまずいか、抗原賦活化が必要かもしれません。
他の組織が染まる場合(そしてその分子が本当に軟骨細胞に存在する場合)、軟骨特有の問題になりそうですね。

もうひとつ感じたこと:そのたくさんの穴の中に本当に細胞が残っていますか?HE染色などで確認できます。残っていない場合、染めようがないですね。

細胞表面の染色 削除/引用
No.179-1 - 2009/03/13 (金) 04:19:41 - 染色
いくつかの組織(パラフィン切片)の免疫染色をしていますが、先日軟骨の染色を行ったところ、細胞がみられませんでした。たくさんの小さな穴の中に期待していた細胞が全くありませんでした。細胞表面のたんぱくをみたかっただけに、残念です。何が原因でしょうか?知人は、固定以降の有機溶媒が原因か?などといっていますが、どうでしょうか?これを防いで、細胞の表面をうまく染色には、どのような方法がよいでしょうか?ご指導いただけると助かります。よろしくお願いします。

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