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限外ろ過について。 トピック削除
No.20-TOPIC - 2009/02/12 (木) 15:07:47 - ネクタイ
タンパク質濃縮のためにスピンカラムタイプの限外ろ過を用いようと思っているのですが、どなたか良い商品を知らないでしょうか?

容量は2-3 mlのサンプルを数十マイクロに濃縮できるものを探しています。
 
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(無題) 削除/引用
No.20-9 - 2009/02/18 (水) 23:37:45 - Viva
セントリコンは昔使ってましたが、凝集物があると詰まってくるのが難点で、
VivaSpinに代えました。これは膜が縦に張ってるのでつまりがほとんど無く
吸着も気になるほどではなかったので、スタンダードになってたのかと思ってましたが、
まだセントリコンの人気は根強かったのですね。
難点は、量がセントリコンの小さいのほどにはならないということかもしれません。
もっとも買いだめしておいたのを使ってるので今VivaSpinが売られてるのか知らないのですが。

(無題) 削除/引用
No.20-8 - 2009/02/18 (水) 19:13:26 - 淡白
ナノセップ(NANOSEP)も短時間で濃縮でき、使い勝手は良いです。

(無題) 削除/引用
No.20-7 - 2009/02/18 (水) 01:51:07 - A
> セントリコンの代替できる性能の品があったら私も知りたいです。

私もセントリコンにはかなりお世話になりました。Milliporeの代替品は
もしかしてAmicon Ultraですか?今はそれを使っていて個人的に回収率で
気になったことは無いのですけど。もちろん以前のタンパク質で比べて
いないのでセントリコンとの違いはわかりませんが。

トピとは関係ないのですが95%以上の精製度のタンパク質をセントリコンで
濃縮した時に主なコンタミとして残っていたタンパク質がセントリコンの
膜に付着してくれて更に精製度が上がったのは良い思い出です。

セントリコン復活希望 削除/引用
No.20-6 - 2009/02/15 (日) 21:15:28 - 亜美紺
アミコンのセントリコンは2mlのサンプルを40ulまで濃縮できて便利でした。非特異吸着もなく、DNAにしろ、タンパク質にしろ、ほとんどのサンプルを95%以上の収率で回収可能でした。そして、どんな希薄サンプルでも同様の高収率で回収できるのがなにより素晴らしかった。
しかし、買収されてから、ミリポアの既存製品のラインナップと被ったこの製品は製造中止になってしまいました。ミリポアのセントリコンの代替製品は、非特異吸着が多くて使い物になりません。
数十〜数百ugの抗体を濃縮しようとしたら、収率1%でした。悲しすぎる。
セントリコンの代替できる性能の品があったら私も知りたいです。
そろそろセントリコンの買い置きが切れてしまいます。

(無題) 削除/引用
No.20-5 - 2009/02/13 (金) 19:46:48 - A
>容量は2-3 mlのサンプルを数十マイクロに濃縮できるものを探しています。

私ならAmiconのmicroconですかね。
大き目の限外ろ過できるのを使ってある程度濃縮して最終段階でmicroconを
使ウという感じかと思います。microconは一回にのせられる容量が0.5mLで
すから3mLでも6回まわすだけですからmicroconだけでも十分かもしれません。

限外ろ過で濃縮すると膜付近だけ濃度が濃くなってサンプルが沈殿したり
しますから、もしアグリゲーションを起こしやすいサンプルなら5-10分
毎に遠心を止めてピペッティングで全体を均一にする操作を含める必要が
あります。

(無題) 削除/引用
No.20-4 - 2009/02/12 (木) 19:10:25 - AP
ザルトリウスの方が目詰まりしにくく流速がはやい感触がありますね。ディスクフィルターなんかもそうですが。

昔の人間にとって、タンパク質の濃縮ならアミコンという固定観念にちかいものがあります。遠心力によって粒子が膜に押しつけられて目詰まりすることを防ぐようになっていたり、必ず少量の水が残り干上がらないようになっていたり、デザインも洗練されています。ミリポアに吸収されてしまいましたが、多くの製品はアミコンブランドでまだ残っていると思います。

(無題) 削除/引用
No.20-3 - 2009/02/12 (木) 17:15:49 - りょう
ミリポアよりザルトリウスの方が個人的に好き(濃縮スピードが速いと思う)

(無題) 削除/引用
No.20-2 - 2009/02/12 (木) 16:34:24 - EcoRI
ミリポアの製品が充実しています
ミリポアのHPでご自分の都合にあった製品を調べてみてください

限外ろ過について。 削除/引用
No.20-1 - 2009/02/12 (木) 15:07:47 - ネクタイ
タンパク質濃縮のためにスピンカラムタイプの限外ろ過を用いようと思っているのですが、どなたか良い商品を知らないでしょうか?

容量は2-3 mlのサンプルを数十マイクロに濃縮できるものを探しています。

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