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(無題) 削除/引用 No.351-5 - 2009/04/19 (日) 10:26:17 - ひがし みなさん、ありがとうございました。 菌体の量も重要なようですね。 フレッシュな菌でやってみます。

(無題) 削除/引用 No.351-4 - 2009/04/18 (土) 15:11:06 - aimar 菌体を多くけん濁しすぎるとダメなことが多いです。 心配になるくらいほんとに少しでもいけます。 　 僕はピペットのチップの先で酵母をつついて薄いNaOH溶液（10mM, 100µl）に酵母をけん濁して、37℃5min。遠心後上清の1µlをゲノムDNAとして使います。

(無題) 削除/引用 No.351-3 - 2009/04/18 (土) 11:22:34 - ひがし さっそくのレスありがとうございます。 プライマーはワークします（ベクターで確認済み）。

(無題) 削除/引用 No.351-2 - 2009/04/18 (土) 10:33:26 - おお 直接コロニーをチップとか爪楊枝でつついて、PCRミックスにつけるだけで いけるとおもうけどなぁ、、、、 プライマーはプラスミドを直接使った場合ワークしますか? 二カ月だと古くなってダメになっている可能性もあるので、線画培養しなおした方がいいでしょうけど,,,,

酵母のコロニーPCR 削除/引用 No.351-1 - 2009/04/18 (土) 09:53:37 - ひがし 酵母のコロニーPCRがうまくいきません。 0.25%のSDS（20μl）にコロニーから取った菌体をけん濁し、180μlのDWを加えて遠心した上清を1μlとってPCRの基質にしています。SDSけん濁液をboilしてもだめでした。コロニーは２ヶ月ほど前の古いものです。よい方法があればご教示お願いします。

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