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培養細胞からのタンパク質の精製について トピック削除
No.359-TOPIC - 2009/04/20 (月) 14:00:10 - カエルの子
こんにちは。いつも皆様の価値のあるコメントを参考にさせて頂いています。
皆様に教えて頂きたいのですが、培養細胞からのタンパク質の精製をする際に使われているキットはどこの会社のものがおすすめでしょうか?できれば、細胞数が少なくてもウエスタンブロットなどがうまくできるような精製純度の高いタンパク質がとれるキットをお知りでしたら、教えて頂ければと思います。タンパク質精製初心者なので、皆様のお力を貸して頂けると幸いです。
 
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No.359-4 - 2009/04/21 (火) 20:51:31 - 名無し
培養細胞の蛋白質の中からある特定の蛋白質(群)を``精製``するということですか。それとも単に細胞を壊して中の蛋白質をできるだけ全部``抽出``してウェスタンで調べるということですか。
前者であれば、どのような蛋白質か分からないとだれも答えようが無いと思いますし、後者ならば目的に応じて組成が変わってくるので、実験目的や対象としている蛋白質またはその性質や分布が分からないとみなさん答えにくいと思います。それに、対象や目的がよほど特殊なものでない限り実験書や過去の文献などみれば自分で試薬は簡単に作れると思いますので特にkitを使うまでのことは無いように思います。

(無題) 削除/引用
No.359-3 - 2009/04/21 (火) 16:53:03 - つん
精製純度などのことはよくわからないのですが、
ウェスタン用のサンプル調製には、
前のラボでは、2×サンプルバッファーを直接使用していました。
今のラボでは、SIGMAのcelLytic M lysis reagentを使用しています。
どちらもウェスタンの結果はきれいに出ていました。

(無題) 削除/引用
No.359-2 - 2009/04/20 (月) 14:10:42 - おお
ウエスタンにそんな精製純度が必要と思えませんが、、、
それとももしかしてサンプルバッファーでやると
エイどうパターンなどきたないしもっときれいに
流れるようなサンプル調整をしたいということでしょうか。

質問の意図がはっきりしませんので、たとえばどんなキット
(商品名とか)が考慮の範疇にあるとかかいていただければ
ようすがわかるかもしれません

培養細胞からのタンパク質の精製について 削除/引用
No.359-1 - 2009/04/20 (月) 14:00:10 - カエルの子
こんにちは。いつも皆様の価値のあるコメントを参考にさせて頂いています。
皆様に教えて頂きたいのですが、培養細胞からのタンパク質の精製をする際に使われているキットはどこの会社のものがおすすめでしょうか?できれば、細胞数が少なくてもウエスタンブロットなどがうまくできるような精製純度の高いタンパク質がとれるキットをお知りでしたら、教えて頂ければと思います。タンパク質精製初心者なので、皆様のお力を貸して頂けると幸いです。

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