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FACSのシース液 トピック削除
No.3629-TOPIC - 2010/12/06 (月) 17:08:03 - ミハイロフ
現在FACSを用いた実験を行っているのですが、
現在行っている実験の関係上、出来る限り細胞へのダメージを無くさなければなりません。
現在使っているFACSのシース液はEDTAや界面活性剤などが含まれており、これらのダメージも実験条件上除きたいのですが、FACSのシース液は、通常のPBS等でも良いのでしょうか?
なにかおすすめや注意点があればご教授願います。

なお実験の対象は微生物全般です。
 
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(無題) 削除/引用
No.3629-6 - 2010/12/07 (火) 14:11:04 - mouse
うちのラボはFACS後に培養したりしないので、滅菌なしのPBSでやっていて
特に問題ありません。

Vantage 削除/引用
No.3629-5 - 2010/12/06 (月) 20:38:26 - ema
通常のFACSは少量ですむのでシースでやってしまってますが、長時間のBD FACS Vantageでは滅菌(A.C)PBS(-)でやっていて全然大丈夫でした。10×の作成時にフィルターかけたら、希釈してからは特にかけてません。ソート後培養があるのでシース構成成分がいやでPBSにしています。
詰まるのは、コンタミで細いチューブ内がだめになる(汚く使ってて、本当にたまたま)くらいで、PBSでつまる(塩析?いやあまりなかったです)ことはなかったです。

(無題) 削除/引用
No.3629-4 - 2010/12/06 (月) 18:24:33 - mAb
講座持ちの解析用FACSはPBS(10×をフィルター処理後、希釈)でやっているケースもありました。
大学共有設備の場合はFACS管理者に相談した方がいいと思います。
PBSにすることでラインが詰まる可能性もあり、保守契約が適応されなくなる等、問題が生じる可能性もあります。

(無題) 削除/引用
No.3629-3 - 2010/12/06 (月) 18:17:54 - ミハイロフ
お返事ありがとうございます。

PBSは濾過滅菌等を行ったものが良いのでしょうか?
それともすでに調整されたどこかのメーカーのPBSですか?

よろしくお願いします。

(無題) 削除/引用
No.3629-2 - 2010/12/06 (月) 17:27:01 - mouse
うちのラボでは普通のFACSにはPBSを使用していますが問題ありません。cell sorterの場合はどうなんでしょうね。

FACSのシース液 削除/引用
No.3629-1 - 2010/12/06 (月) 17:08:03 - ミハイロフ
現在FACSを用いた実験を行っているのですが、
現在行っている実験の関係上、出来る限り細胞へのダメージを無くさなければなりません。
現在使っているFACSのシース液はEDTAや界面活性剤などが含まれており、これらのダメージも実験条件上除きたいのですが、FACSのシース液は、通常のPBS等でも良いのでしょうか?
なにかおすすめや注意点があればご教授願います。

なお実験の対象は微生物全般です。

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