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細胞の大きさの測定 トピック削除
No.3691-TOPIC - 2010/12/15 (水) 23:04:21 - ATCC
倒立顕微鏡を用いて、シャーレ上の培養細胞を観察しています。細胞に刺激を加えると、細胞が少し大きくなるのですが、どれくらいおおきくなるのか示そうと考えています。
いろいろ論文をみると、免疫染色の細胞像で細胞の長さを示してある(写真の下のほうに目安の線を引いてある)のが結構あるのですが、あれと同じようにデジカメで撮った写真に目安の線を加えて大きさの違いを示そうと考えています。
しかし、カメラおよびPCに接続した顕微鏡や解析ソフトは研究室になく、また、研究室で細胞の写真を撮るときは、デジカメのレンズを顕微鏡の接眼レンズの部分に直接当ててとっています。
このような状況なのですが、細胞の長さを測るのにいい方法はないでしょうか?
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.3691-5 - 2010/12/16 (木) 20:11:14 - ATCC
情報ありがとうございます。
相対的な比較方法については、おお様、TS様ありがとうございました。
ami様の情報をもとに調べてみたところ、おっしゃるようなシートが販売されておりました。こちらの方は絶対値が出せるので購入を検討したいと思います。
皆様ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.3691-4 - 2010/12/16 (木) 01:57:29 - おお
相対的でいいなら同じ倍率(レンズ)で両者のイメージをカメラでとり、 NIHイメージなどで細胞が占めるエリア(面積)を細胞一つ一つにタイして算出し(ピクセル数として値がでるとおもう)、平均値を求めれば大きさの比較は余程形が複雑でない限りできると思う。

面積でなく長けいや短けい、直径などを求めても可能です。

両者とも実際の体積ではありませんし、顕微鏡で見ているのは上から眺めただけのイメージで形全体を反映してません。FOCUSがあっている場所によっても同じ細胞をみていても値が変わる可能性もあります。ただこれは測定する細胞数を増やすと差を見るという意味では解消できると思います。

うぅんと 削除/引用
No.3691-3 - 2010/12/15 (水) 23:56:24 - ami
普通の顕微鏡につけられるカメラ用の、スケールあわせ用の、目盛りのついた下敷きみたいなのがある。細胞置く場所にその下敷きを置いて、撮影する。たぶんそれだけで買える。それ使えば大丈夫。

(無題) 削除/引用
No.3691-2 - 2010/12/15 (水) 23:47:46 - TS
細胞を撮影する条件と同じ条件で、目盛がついている何かを撮影しておけばよいのではないでしょうか。

それを基準に計算できると思います。

専用(?)のものとしては、対物ミクロメーターがあります。

細胞が接着している面と、対物ミクロメーターの面が同じ高さでないと、ズレが生まれますが。

ほかにもっとスマートな方法があるかな?

細胞の大きさの測定 削除/引用
No.3691-1 - 2010/12/15 (水) 23:04:21 - ATCC
倒立顕微鏡を用いて、シャーレ上の培養細胞を観察しています。細胞に刺激を加えると、細胞が少し大きくなるのですが、どれくらいおおきくなるのか示そうと考えています。
いろいろ論文をみると、免疫染色の細胞像で細胞の長さを示してある(写真の下のほうに目安の線を引いてある)のが結構あるのですが、あれと同じようにデジカメで撮った写真に目安の線を加えて大きさの違いを示そうと考えています。
しかし、カメラおよびPCに接続した顕微鏡や解析ソフトは研究室になく、また、研究室で細胞の写真を撮るときは、デジカメのレンズを顕微鏡の接眼レンズの部分に直接当ててとっています。
このような状況なのですが、細胞の長さを測るのにいい方法はないでしょうか?

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