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(無題) 削除/引用 No.3694-5 - 2010/12/20 (月) 08:43:35 - おお ウエスタンとか違う系で発現を確認してみれば?

(無題) 削除/引用 No.3694-4 - 2010/12/20 (月) 00:22:39 - AA 染めたい抗原が何かによって、うまくいっているかいないか考えないといけないと思います。 経験上、P7で染まる染色条件であれば、P0でもそれほど変わるとは思えません。(変えなくても染まると思います) 染まるという確信のある抗体ですか？ 染まるという前提を仮定して、一つの可能性としては潅流がうまくいっておらず血管に血液が残っている場合、免疫染色はうまくいかないことがあります。

(無題) 削除/引用 No.3694-3 - 2010/12/17 (金) 17:12:27 - 小児科医師（ゆとり教育） 染色されないのが重要な所見、という可能性はいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.3694-2 - 2010/12/17 (金) 03:03:38 - 通りすがり Ｐ７やＰ１４とＰ０を比べると、細胞の分化などの状態がかなり違うと思いますが、ひょっとしてＰ０にない抗原を染めているということはないでしょうか。

マウス新生児の脳での免疫染色の方法 削除/引用 No.3694-1 - 2010/12/16 (木) 17:05:31 - MTA 現在、新生児マウス(P0)の脳切片での免疫染色が全くできません。 P7やP14では染色可能なのですが、P0に対しては全く染色されません。 P0,P7,P14と同様の方法、同様の抗体で染色しています。 P0では免疫染色を行う際に注意する点や行うべき点がありましたらご教授ください。 以下に、実際に行った染色法を掲載します。 4%PFA/PBSで還流固定 4%PFA/PBSで4℃ O/Nで固定 30%スクロース／PBS　4℃　48h以上 凍結切片作成　25um or 10um 4%PFA/PBSでRT 10min で固定 PBS 5min x3 ブロッキングブッファー RT 2h 一次抗体　olig2 or S100 4℃　O/N PBS 5min x5 二次抗体　RT 2h PBS 5min x5 封入　観察

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