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マウスT細胞の増殖について トピック削除
No.3714-TOPIC - 2010/12/20 (月) 17:25:00 - mukio
免疫系の実験でB6マウスの脾臓から採取したT細胞を増殖させたいのですが、免疫系の実験はしたことがなく、素人のせいかなかなか上手くいきません。

どなたかアドバイスしていただけたら嬉しいです。

dynabeads Mouse T-ActivatorCD3/CD28とIL-2 30U/mlの条件(説明書通り)でT細胞を培養しているのですが、何度やっても増えるどころか減っていきます。IL-2のtiterが弱いのかと思い5倍、10倍の条件で試したのですが結果は同じでした。

T細胞を増殖したことがある方、何かアドバイスありましたらよろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3714-3 - 2010/12/22 (水) 23:55:52 - HIH
記述されている条件は普通なので、おそらく基本的な問題があるのだと思いますが、この手のトラブルで一番多いのはメディウムです。

使用している培地と一般的にT細胞に用いる培地の組成を比較してみてはいかがでしょうか。

加えて採ってきたT細胞はCD4かCD8かによって状況が多少変わります。CD4で増えないのであれば多分培地の問題です。

まずは 削除/引用
No.3714-2 - 2010/12/20 (月) 23:34:07 - ami
条件を詳細に記されよ。そんなに難しいことではないので、初歩的なミスのはず。条件を詳細に。

マウスT細胞の増殖について 削除/引用
No.3714-1 - 2010/12/20 (月) 17:25:00 - mukio
免疫系の実験でB6マウスの脾臓から採取したT細胞を増殖させたいのですが、免疫系の実験はしたことがなく、素人のせいかなかなか上手くいきません。

どなたかアドバイスしていただけたら嬉しいです。

dynabeads Mouse T-ActivatorCD3/CD28とIL-2 30U/mlの条件(説明書通り)でT細胞を培養しているのですが、何度やっても増えるどころか減っていきます。IL-2のtiterが弱いのかと思い5倍、10倍の条件で試したのですが結果は同じでした。

T細胞を増殖したことがある方、何かアドバイスありましたらよろしくお願いします。

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