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(無題) 削除/引用 No.3727-4 - 2010/12/24 (金) 11:57:46 - WB ローテーターはどのようなものをお使いでしょうか？ シーソー式ではなく重心を中心とした360波打つ様なタイプじゃないですか？ もし、後者のようなタイプを使用しているなら、サイドと中心部で抗体に浸っている時間が違うということはないですか？ ローテーターをシーソー式にすると劇的に変わりますよ。経験済みですので参考まで。

(無題) 削除/引用 No.3727-2 - 2010/12/23 (木) 18:10:19 - おお ロードするサンプル(サンプルバッファーがはいった状態)のグリセロールの量を減らす。特にもともとのlysis bufferにグリセリールが入っていると大過剰になりがち。 ということをちょっと昔にかいたことがあるんですけどおなじ人じゃないよね。

ウェスタンのバンド 削除/引用 No.3727-1 - 2010/12/23 (木) 17:56:44 - wwwee いつも勉強させて頂いております。 ウェスタンブロットのバンドに関して質問です。 最後にバンドを検出した時に、バンドの両端もしくは片端が中心部よりかなり濃くなってしまうことがよくあり、評価に影響して困っています。 これを防ぐ方法を知っておられる方がいらっしゃいましたらご教授の程、宜しくお願い致します。 ウェスタンブロットにはBIORADのミニプロティアンキットをもちいています。PVDFメンブレンに転写後、Blocking,１＆２次抗体反応を経て、ECLによる検出を行っております。

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