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クロンテックのレンチベクター トピック削除
No.3745-TOPIC - 2010/12/29 (水) 07:03:46 - Mariko no heya
どなたか。クロンテックのpLVX系のレンチベクターとpCMVΔ8.9でレンチウイルスを作ったことがある方いらっしゃいますでしょうか?なぜかうまくいかなくて不思議に思っています。今まではpEFBOSがバックボーンのIRES-GFPベクター(tat dependent)を使用していましたが、こっちはうまくウイルスができます。しかし、IRES-tdTomatoのクロンテックのベクターにするとなぜかうまくいきません。クロンテックのLenti-X expressionキットは高くてやってられないので、何とかΔ8.9を使いたいのですが。
 
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No.3745-5 - 2010/12/31 (金) 01:24:00 - Mariko+no+heya
ご心配ありがとうございます。
今国外でして、普通にP2みたいに使用しています。日本ではP3ですか。しりませんでした。
delta 8.9はDr. Trono由来で、gag,pol,rev,tatを発現するとのこと。
Nat Biotechnol. 1997 Sep;15(9):871-5.
ただ、ベクターをもらった先方はseq dataをっておらず。単純にdelta 8.9でぐぐるとgag/pol expressorといっている人もおり、若干不安には思っているところです。しかし、pGIPZもtat dependentでこちらは動いているので大丈夫だとは思っています。

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No.3745-4 - 2010/12/30 (木) 14:30:27 - くり
えっと、クロンテックのレンチベクターはTat必須ですよ。
ちなみに、日本ではBSL3レベル扱いになるので、普通のラボでは使えないですけど、大丈夫ですか?

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No.3745-3 - 2010/12/30 (木) 02:14:18 - Mariko+no+heya
どうもありがとうございます。
第3世代のベクターですね。しかもVenusが入っていていい感じです。
tatを含む他の第2世代packaging vecterを試して、だめだったら、考えてみようと思います。

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No.3745-2 - 2010/12/29 (水) 10:57:10 - Actias
安くて、というなら、研究者から入手する手がありますが?

http://www.brc.riken.jp/lab/cfm/Subteam_for_Manipulation_of_Cell_Fate_J/Lentiviral_Vectors_J.html

クロンテックのレンチベクター 削除/引用
No.3745-1 - 2010/12/29 (水) 07:03:46 - Mariko no heya
どなたか。クロンテックのpLVX系のレンチベクターとpCMVΔ8.9でレンチウイルスを作ったことがある方いらっしゃいますでしょうか?なぜかうまくいかなくて不思議に思っています。今まではpEFBOSがバックボーンのIRES-GFPベクター(tat dependent)を使用していましたが、こっちはうまくウイルスができます。しかし、IRES-tdTomatoのクロンテックのベクターにするとなぜかうまくいきません。クロンテックのLenti-X expressionキットは高くてやってられないので、何とかΔ8.9を使いたいのですが。

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