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お礼と追加の質問。 削除/引用 No.3772-3 - 2011/01/06 (木) 21:41:56 - 教えて下さい。 教えていただきありがとうございました。価格的に安ければいろいろ作って、あるていど試行錯誤もありかなとおもうのですが、結構値段が高いので出来ることなら１発で決めたいので、注文する前にここで聞いてみました。重要なsuggestionをいただきとても助かりました。抗FITC抗体で、組織に局在したFITCpeptideを検出する場合、固定やパラフィン包埋の過程でFITCの構造というか抗原性は維持されているのでしょうか。壊れたりとはしないでしょうか。経験ある方いらっしゃいましたら教えていただけるとありがたいです。よろしくお願いいたします。

pep標識 削除/引用 No.3772-2 - 2011/01/05 (水) 13:34:30 - ema フレッシュ、エタノールなどで固定した場合FITC蛋白は流れる事が多いです。あえて、、、４％パラフォルムなら。 本当にフレッシュでちょっとみるなら（乾燥し過ぎす）生の方がきれいなんですが。 もともと組織自体が自家蛍光が強いのですね。パラフィンの場合はフレッシュより自家蛍光が高い（FITCに近似の黄から緑のは特に）標本になります。から、a-FITC検出のほうが安全かも。 バックが高くなるのを承知で、-Bio(FITCもBioも比較的標識来やすく、安いのですが）-StAv(なんか遠め波長）とか、波長をいろいろでも高くてよければAlexaのなにかとか、純粋なペプチドを標識ならULS試薬でCy3,Cy5とか、色々やり方はあります。

静注したFITC-ペプチドの免疫組織化学的解析 削除/引用 No.3772-1 - 2011/01/05 (水) 00:04:08 - 教えて下さい FITC標識したペプチドを動物に投与しその組織分布を組織化学的に調べたいのですが、この場合フォルマリン固定パラフィン切片がよいのでしょうか。それとも凍結切片がよいのでしょうか。固定、包埋の過程でFITCが壊れてしまう事がないか心配なもので。見たい組織は自家蛍光が強い組織なので、抗FITC抗体で検出しようと考えています。 もし適切でなければin vivoの分布を調べる上でより適した標識はあるでしょうか。

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