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ROCK inhibitorの評価について トピック削除
No.3876-TOPIC - 2011/01/25 (火) 14:54:24 - us
ROCK inhibitor(Y-27632)を使用して細胞培養を行っています。
そこで質問させていただきたいのですが、そもそもこのROCK inhibitorが作用していると確定するにはどうしたらいいでしょうか?
自分で調べた限りでは色々なリン酸化を進めていくのですが、簡潔になにか遺伝子のup、downなどがあればそれをPCRかければいけるのかとも思ったのですが・・調べた論文には細胞に作用していることを証明するものはありませんでした。
もしご存じの方がいらっしゃいましたらお知恵を貸していただけると大変助かります。よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3876-2 - 2011/01/25 (火) 18:12:18 - TS
PCRが良いのですか?

キナーゼの阻害作用を検証するのですから、基質のリン酸化を評価する方が良いのではないですか?
ROCKのターゲットとしては、MLC、MYPTあたりがメジャーだと思いますが。

これに関しては、論文はいくらでもあると思います。

ROCK inhibitorの評価について 削除/引用
No.3876-1 - 2011/01/25 (火) 14:54:24 - us
ROCK inhibitor(Y-27632)を使用して細胞培養を行っています。
そこで質問させていただきたいのですが、そもそもこのROCK inhibitorが作用していると確定するにはどうしたらいいでしょうか?
自分で調べた限りでは色々なリン酸化を進めていくのですが、簡潔になにか遺伝子のup、downなどがあればそれをPCRかければいけるのかとも思ったのですが・・調べた論文には細胞に作用していることを証明するものはありませんでした。
もしご存じの方がいらっしゃいましたらお知恵を貸していただけると大変助かります。よろしくお願いいたします。

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