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パルミチン酸の溶かし方 トピック削除
No.3888-TOPIC - 2011/01/27 (木) 14:23:59 - SM
パルミチン酸を培地に加える実験をするために、このフォーラムの過去の記事及び論文を参考に溶解法を検討しています。現在行っているプロトコールは以下の通りです。

@パルミチン酸を80℃前後の水に溶解させる(この時点で0.5M)
A55℃に温めた1.76%BSA入り培地にパルミチン酸溶解液を加える(0.1M)
Bボルテックスで10秒間激しく撹拌後、55℃で10分間インキュベーション
C0.45μmフィルターでろ過し0.1Mストック溶液とする

A〜Cの操作に関して質問があるのですが、Aでパルミチン酸を加えた後一気に析出してしまいます。Bの操作でも溶けないままなのでCの操作後、本当に0.1Mストックが作れているのかが心配です。

このプロトコールでだいしょうでしょうか?アドバイスを頂けたら幸いです。よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3888-3 - 2011/01/28 (金) 09:24:23 - ~
>Bの操作でも溶けないままなのでCの操作後、本当に0.1Mストックが作れているのかが心配です。
ろ過で不要画分が除かれている以上、心配というかできていませんよね。
(それでも成立する実験なのかどうかは分かりませんが)

プロトコル自体は信頼できるソースから取ってきたものだという前提で。

@パルミチン酸はフリーアシッドなのでしょうか?ナトリウム塩を用いているものも見たことがあります。
また、水は水なのでしょうか?水酸化ナトリウム水溶液を用いているものも見たことがあります。

ABSAのグレードはいろいろありますが、ソースと同じグレードですか?
違う非水溶性物質とキャリアーの組合せでですが、1滴ずつゆっくり入れるとうまくエマルジョンが形成するが、どばっと入れると分離することがあります。入れ方はソースと同じですか?
見かけた文献ではBSAとパルミチン酸のモル比が書かれているものの10倍以上でしたが、ソースでも同じ培地、濃度(BSA、パルミチン酸)なのですか?

Cソースでもフィルターろ過はしていますか?溶けていればいいのですが、エマルジョンであればろ過は難しいです。

(無題) 削除/引用
No.3888-2 - 2011/01/28 (金) 07:58:46 - チョコパイ
ソニケーションしてみたら?

パルミチン酸の溶かし方 削除/引用
No.3888-1 - 2011/01/27 (木) 14:23:59 - SM
パルミチン酸を培地に加える実験をするために、このフォーラムの過去の記事及び論文を参考に溶解法を検討しています。現在行っているプロトコールは以下の通りです。

@パルミチン酸を80℃前後の水に溶解させる(この時点で0.5M)
A55℃に温めた1.76%BSA入り培地にパルミチン酸溶解液を加える(0.1M)
Bボルテックスで10秒間激しく撹拌後、55℃で10分間インキュベーション
C0.45μmフィルターでろ過し0.1Mストック溶液とする

A〜Cの操作に関して質問があるのですが、Aでパルミチン酸を加えた後一気に析出してしまいます。Bの操作でも溶けないままなのでCの操作後、本当に0.1Mストックが作れているのかが心配です。

このプロトコールでだいしょうでしょうか?アドバイスを頂けたら幸いです。よろしくお願いします。

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