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Thymidine Uptakeの実験 トピック削除
No.3954-TOPIC - 2011/02/07 (月) 23:29:48 - ami
お世話になっております。

RIを使用して、Thymidine Uptakeの実験を行っています。自動のセルハーベスターを使って、紙の上に細胞を回収しているのですが、機械の調子がすこぶる悪くて、、、機械なしでできる方法ありませんか。

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3954-3 - 2011/02/08 (火) 09:59:19 - ami
>機械の調子がすこぶる悪くて、、、機械なしでできる方法ありませんか。

機械の調子が悪いとは具体的に?
まずはここを正確に記述するといいかもですね。

私もハーベスターを一時期頻用していました。
やはり3/28等で叩くと細胞がアグリながら増えるものですからすぐにハーベスターのラインやろ紙がつまり実験誤差が大きくなります。

私の場合には、増殖刺激を与えた後、数日後解析8時間ほど前に3H-TdHを添加し、ハーベスト直前にplateごとmixerにかけてできるだけアグリをほぐしました。結果は良好です。

また、メンテナンスも定期的にした方がbetter。
RIセンターにお願いして業者さんに診てもらうことをお勧めします。

それから当然Waterが十分にないと、適切な圧力がかかりませんので、十分補充した後行うとよいです。


>機械なしでできる方法ありませんか。

wellの細胞をピペッティングしてダイレクトに液シンカクテルに入れる。
この場合いちいちデタージェントを使用する必要は当然にありません。
上手く行きます。

Thymidine Uptake 削除/引用
No.3954-2 - 2011/02/08 (火) 03:12:37 - a
浮遊細胞:遠心?
接着細胞:そのまま洗浄後、デタージェントなど加えて回収?

Thymidine Uptakeの実験 削除/引用
No.3954-1 - 2011/02/07 (月) 23:29:48 - ami
お世話になっております。

RIを使用して、Thymidine Uptakeの実験を行っています。自動のセルハーベスターを使って、紙の上に細胞を回収しているのですが、機械の調子がすこぶる悪くて、、、機械なしでできる方法ありませんか。

よろしくお願いします。

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