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マイクロダイセクション用の標本作成法 トピック削除
No.525-TOPIC - 2009/05/22 (金) 14:43:54 - こまった拝
ARCTURUS社LM200の機器でマイクロダイセクションを行うために
パラフィン切片スライドの作成を試みようとしています。
スライドグラスに貼り付けた組織がうまくキャプチャーされないとの
話を耳にしました。
普通にコート剤のないスライドグラスに載せて作成しては
うまくはがれないのでしょうか?
少ない組織を無駄にはできないので、何か良い方法をご存知の方がいらしたら
ご伝授願えませんでしょうか?
よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.525-6 - 2009/05/27 (水) 18:03:20 - こまった拝
専用スライドグラスがニップンテクノクラスタ社から出ているそうです。

(無題) 削除/引用
No.525-5 - 2009/05/27 (水) 17:47:39 - こまった拝
技官さんにコート剤の付いていないスライドガラスで通常通りに
貼り付けてもらい行いましたが、うまく行きました。
ちなみにtaniさんはその手法で細胞を回収した後は、
何をなさっているのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.525-4 - 2009/05/26 (火) 18:12:22 - tani
>ここで水に戻すのはなぜでしょう?
>ちぢんだり皺になったりしないのでしょうか?

試行錯誤でそうなっただけです、論文にはありません。論文にするほどのものでもないですが。
今のARCTURUSの機械はそんなことすることもないのですが、使用していた古いLM100はキヤプチャーの難しい機械でした。

あまり、べったり貼付けると剥がれないことは分かっていましたが、貼り付いているようで貼り付いていない状態でスライドをつくることに努力しました。当初、フイルムに貼付けましたが、粘着が弱すぎて染色で切片が流れてしまいました。次にスリガラスに貼付けてみました、機械にかけて切片を見るとスリガラスの凹凸で拡散フイルタをかけても、何が何だかわかりませんでした。

温度をかけると、べったり貼り付くので、最後に、水に一度戻す事で、切片が多少ゆがみます、そのまま風乾させると、切片のある部分はスライドにくっついて、ある部分は剥がれているのでしょうね、染色しても剥がれることなく、また細胞も回収のいまのところうまく言ってます(多少、苦労話)。

(無題) 削除/引用
No.525-3 - 2009/05/25 (月) 17:59:49 - こまった拝
早速のお返事ありがとうございます。

1)10ミクロンくらいで切ったパラフイン切片を水に浮かべます
2)そのパラフイン切片をお湯で伸ばします。
3)その切片また水に戻します。

ここで水に戻すのはなぜでしょう?
ちぢんだり皺になったりしないのでしょうか?

また、このまま貼り付けて、HE染色するとはがれるのではないでしょうか?

この方法は、どちらの論文からの引用ですか?
もしそうでしたら、その論文を教えていただけないでしょうか?

お忙しいところ、申し訳ありませんが
よろしくお願いいたします。

マイクロダイセクション用の標本作成法 削除/引用
No.525-2 - 2009/05/22 (金) 19:17:12 - tani
スライドグラスにベッタリ貼付けないように貼付けます。
1)10ミクロンくらいで切ったパラフイン切片を水に浮かべます
2)そのパラフイン切片をお湯で伸ばします。
3)その切片また水に戻します。
4)それをスライドグラスですくいます。
5)そのまま扇風機で乾燥させます。
一度、お試しを、ダメなら次の手を考えましょう。

マイクロダイセクション用の標本作成法 削除/引用
No.525-1 - 2009/05/22 (金) 14:43:54 - こまった拝
ARCTURUS社LM200の機器でマイクロダイセクションを行うために
パラフィン切片スライドの作成を試みようとしています。
スライドグラスに貼り付けた組織がうまくキャプチャーされないとの
話を耳にしました。
普通にコート剤のないスライドグラスに載せて作成しては
うまくはがれないのでしょうか?
少ない組織を無駄にはできないので、何か良い方法をご存知の方がいらしたら
ご伝授願えませんでしょうか?
よろしくお願い致します。

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