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(無題) 削除/引用 No.780-7 - 2009/07/02 (木) 14:02:01 - AP >Lambda gt10ですか、久しぶりに聞きましたね（実物は手にしたことありません）。 気がつかなかったけれど、いま売ってないんですね。AmershamとかPharmaciaとか（合併して吸収されて跡形もないですが）、プロメガとか、多くのメーカーで扱われていたんですが。歳がばれそうですが、当時使っていたあまりが（特にコントロール用のintactなやつなんか）どっかのフリーザーで眠っているような。 代案として、 宿主菌の中にはlambda phageをlysogenとして保持しているものがあります。たとえばBL21(DE3)など。lysogenでもcIにmutationを持つものもあるようですが、その場合は遺伝子型が書いてあると思うので、BL21(DE3)のは大丈夫じゃないかな（なんたって現に溶原化してるんだから）。 ttp://www.brc.riken.go.jp/lab/dna/search/allhost.html

(無題) 削除/引用 No.780-6 - 2009/07/02 (木) 13:24:20 - きゅうり >[Re:4] Pumpkinさんは書きました : > Lambda gt10ですか、久しぶりに聞きましたね（実物は手にしたことありません）。どこかでまだ売っているといいのですが、どうでしょうか。gt11はストラタとかでまだ売っていますが、cI857ですしねぇ。Lambda gt10で作ったライブラリーなんかを手に入れられれば、PCRで切り出せるのですが。 > > んー、温度感受性がどうのってかいてあるけど、こんなのはだめですか。 > http://www.stratagene.com/products/displayProduct.aspx?pid=383 > > やっぱ、ファージはストラタかクロンテック（もうあまりあつかってないけど）とかノバジェンでしょうか。 ありがとうございます。ストラタジーン、クロンテック、ノバジェンのサポートに聞いてみます。

(無題) 削除/引用 No.780-5 - 2009/07/01 (水) 21:33:53 - Pumpkin すいません、テンプレート用途としてはあまりに法外なお値段でした。

(無題) 削除/引用 No.780-4 - 2009/07/01 (水) 21:25:48 - Pumpkin Lambda gt10ですか、久しぶりに聞きましたね（実物は手にしたことありません）。どこかでまだ売っているといいのですが、どうでしょうか。gt11はストラタとかでまだ売っていますが、cI857ですしねぇ。Lambda gt10で作ったライブラリーなんかを手に入れられれば、PCRで切り出せるのですが。 んー、温度感受性がどうのってかいてあるけど、こんなのはだめですか。 http://www.stratagene.com/products/displayProduct.aspx?pid=383 やっぱ、ファージはストラタかクロンテック（もうあまりあつかってないけど）とかノバジェンでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.780-3 - 2009/07/01 (水) 18:58:26 - AP cDNA libraryを作るときに、Hflのホストで非組換え体を排除する（プラーク形成さない）ような選択が可能な系では、原理的にcI+のラムダファージベクターを使います。代表的なのはlambda gt10。ほかにもHflのホストが推奨されている、あるいは添付されて販売されているファージベクターならokでしょう。

(無題) 削除/引用 No.780-2 - 2009/07/01 (水) 18:57:47 - Pumpkin う〜ん、私は見たことないですね。そもそもcIが失活しているからこそプラークとして認識できてライブラリースクリーニングできるわけですから。 例えばTaKaRaさんとかで売ってるLambdaもcI857ind1 Sam7です。例えばLambdaじゃなくてもいいんですか？ あ、Lambdaでと書いてありましたね。失礼しました。

λファージのCIリプレッサー領域 削除/引用 No.780-1 - 2009/07/01 (水) 18:25:21 - きゅうり いつもお世話になっております。 λファージのCIリプレッサー領域をPCRでクローニングしたいのですが、NEBで売られているファージDNAはλcI857ind1 Sam7という非溶原性（CIリプレッサー領域に変異が入っている）から抽出されたもので使うことができません。どなたか、CIリプレッサー領域に変異の入っていないλファージまたはそのDNAを購入できるところをご存知ではないでしょうか？ よろしくお願いいたします。

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