全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.7699-6 - 2019/02/18 (月) 14:23:06 - asan 0.0001%でも何度か連続でFACSソーティングとかすれば濃縮できると思います。 ゲーティングストラテジーで最初にざっくりと上位数％の分画を取得して、 それを再度FACS展開すれば1/100にでもなるでしょ。 回収した後培養してポジティブな細胞を増やせるならもっと濃縮できるかもしれませんけどね。 フェノタイピングによる遺伝子のクローニングとかでにたようなことは過去にやられてます。

(無題) 削除/引用 No.7699-5 - 2019/02/18 (月) 13:31:17 - おお 抗体とDNAのコンプレックスをつくって特異的な細胞にそのDNAを発現させるような試みはありますが、その効率があなたの実験で現実的なものかどうか、、、

(無題) 削除/引用 No.7699-4 - 2019/02/18 (月) 11:12:23 - おお その発現している細胞は継続的（恒常的）にその遺伝子を発現しているとお考えですか？ここの細胞が発現したりしなかったりしていて、全体的にそのくらいのポピュレーションにみえるということはないですか？ 後者の場合濃縮できたとしても、培養しているうちに発現している細胞がへる可能性があるので、、、

(無題) 削除/引用 No.7699-3 - 2019/02/18 (月) 10:28:58 - 櫓冬 TK-1様 ありがとうございます。 根拠に関しては、研究開発の部分が関わってくるので、ここで詳細に述べることはできません。 本当に申し訳ありません。 やはり無理でしょうか。。

(無題) 削除/引用 No.7699-2 - 2019/02/18 (月) 07:56:38 - TK-1 >[Re:1] 櫓冬さんは書きました : > 初めまして、質問させてください。 > > ある膜表面マーカーを発現する細胞を単離してきたいのですが、ある処置を加えた癌セルラインのうち0.001％の細胞がそれを発現しているだろうと計算上予想しています。 > 根拠はなんですか。

FACSでもなくMACSでもなく... 削除/引用 No.7699-1 - 2019/02/18 (月) 05:44:58 - 櫓冬 初めまして、質問させてください。 ある膜表面マーカーを発現する細胞を単離してきたいのですが、ある処置を加えた癌セルラインのうち0.001％の細胞がそれを発現しているだろうと計算上予想しています。 ただ、0.001％ではFACSでソートするのはたとえ癌セルラインであっても厳しいですし、MACSを何度かかけてエンリッチしてからFACSに持ち込むのもうまくいきませんでした。 表面マーカーを認識する抗体は豊富に持っています。 どうにかしてFACS、MACSせずに”初期段階”で濃縮するステップをかませられないかと考えています。 0.001％を0.1％もしくは1％まで濃縮できれば、そこでようやくFACSやMACSに行きたいです。 抗体を何かでラベルすることでその細胞だけが生存し、ラベルしなかった細胞は死滅するようなうまい仕組みがあればいいのですが、そんなことはないと思います...なにかアイデアがありましたらシェアしていただけませんでしょうか？ 宜しくお願い致します。

全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---