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培養細胞からの脂質抽出
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No.1464-TOPIC - 2013/02/20 (水) 11:54:50 - 卒論炎上寸前
培養細胞から脂質抽出をし、トリグリセライドEテスト ワコーを用いて脂質測定をしたいと考えております。
肝臓の組織からForch法によって抽出して測定し、肝臓片の重量で補正する方法なら存じ上げておりますが、培養細胞の場合、重量で補正するのは厳しいと思われますので、タンパク量で補正しようと考えております。
しかしながら、Forch法ではタンパク質が除去されてしまうため、今回は適当ではありません。
Forch法以外で脂質を抽出し、タンパクで補正することができる方法を教えてください。
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No.1464-6 - 2013/02/21 (木) 06:30:48 - おお
>[Re:5] APさんは書きました :
> どの方法にせよ、総脂質の抽出になると思うので、同時に抽出されるリン脂質のリン定量で補正したらどうでしょうか。同じ脂質なのでタンパク質、核酸などより抽出効率のバイアスがかかりにくいと思います。
私もそう思いますね。脂質をやっていて、あえてそれをやらないと言うのが気になっていたりもしてます。あえてじゃないのかもしれませんけど。
(無題)
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No.1464-5 - 2013/02/20 (水) 18:01:43 - AP
どの方法にせよ、総脂質の抽出になると思うので、同時に抽出されるリン脂質のリン定量で補正したらどうでしょうか。同じ脂質なのでタンパク質、核酸などより抽出効率のバイアスがかかりにくいと思います。
(無題)
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No.1464-4 - 2013/02/20 (水) 16:16:05 - おお
まあなんとでもなるとおもいますが、よくかんがえてみてください。
すでに指摘があるように、少しプロトコールを簡単に書いてくださると具体案がかけるかもしれません。
メタノールクロロフォルム法というタンパク回収方法もありますけど、、、
(無題)
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No.1464-3 - 2013/02/20 (水) 15:16:45 - Seicho
質問の答えにはなりませんが、タンパクではなくDNAコンテントで補正するのはいかがでしょう。
(無題)
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No.1464-2 - 2013/02/20 (水) 12:45:52 -
qq
フラスコかdishの細胞から、細胞をC-Mと混ぜるところまでの操作を書いてみてくださいな。まさか、プラスチックシャーレに直接C-Mを突っ込む訳ではないでしょ?
だから、細胞ホモジネートの一部をサンプリングできると思うけど?
培養細胞からの脂質抽出
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No.1464-1 - 2013/02/20 (水) 11:54:50 - 卒論炎上寸前
培養細胞から脂質抽出をし、トリグリセライドEテスト ワコーを用いて脂質測定をしたいと考えております。
肝臓の組織からForch法によって抽出して測定し、肝臓片の重量で補正する方法なら存じ上げておりますが、培養細胞の場合、重量で補正するのは厳しいと思われますので、タンパク量で補正しようと考えております。
しかしながら、Forch法ではタンパク質が除去されてしまうため、今回は適当ではありません。
Forch法以外で脂質を抽出し、タンパクで補正することができる方法を教えてください。
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