先生は指定した条件でPCRで増やせる根拠があるのかもしれません。
手間取るようであれば、とりあえず1回目のPCRで増えなかったことと、どう対応するつもりなのかを報告しておきましょう。
条件を言われるかもしれませんし、プライマーの配列を変えてもいいといわれるかもしれません。
少なくとも、言われたPCRをやらずに遊んでいるとは思われなくなります。
失敗とはどのような結果だったのでしょうか。
なにも増えない場合と、目的のバンドとほかのバンドの両方が増える場合と、ほかのバンドのみが増える場合では、対処法が変わってきます。
また、目的はクローニングでしょうか?定量でしょうか?
クローニングならば、非特異がでてもかまわないので目的のバンドらしきものが増幅するまで温度を下げて増やし、切り出して回収することができるかもしれません。
プライマーを作り直すのであれば今のプライマーよりも外に設計し、nested PCRにしてもいいかもしれません。 |
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