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(無題) 削除/引用 No.5685-3 - 2017/01/18 (水) 12:03:34 - Chip おお様 ありがとうございます．ご指摘の通りですね． 酸でタンパクが変性することを心配していたことが，はずかしかったです笑

(無題) 削除/引用 No.5685-2 - 2017/01/18 (水) 11:54:33 - おお サンプルバッファーをつかって抗体ごと溶出しています。 RIPAでは溶出しないか効率がかなり悪い事が多いのでは？ ＞エリューションステップでは酸に曝したりするので，タンパク変性が起きないかも懸念しています． 起きる可能性は高いですが変性が起きて困る実験をしているのですか？WBするならさらにSDSで変性させますので懸念にはならないはずです。

免沈後のタンパクのエリューションは必須ですか？ 削除/引用 No.5685-1 - 2017/01/18 (水) 10:59:10 - Chip 免疫沈降でタンパクを回収した際に，ビーズ＋抗体から目的のタンパクを外すエリューションステップは必須でしょうか？ ビーズ＋抗体＋タンパクをダイレクトにRIPAやSDSサンプルバッファーで処理して，抗体の重鎖や軽鎖がウエスタンブロット解析の邪魔にならなければ，エリューションステップは必ずしも必要ないのかな？と思い，トピックを立てました．エリューションステップでは酸に曝したりするので，タンパク変性が起きないかも懸念しています． ご意見などうかがえましたら幸いです．

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