Bio Technical フォーラム

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試薬の同時希釈方法 トピック削除
No.6156-TOPIC - 2017/07/26 (水) 16:33:37 - マノラス
化学実験で、希釈のことについて伺います。

今、10mg/mL β-eudesmol DMSO溶液があります。
これをD-MEM培地に含ませる際に

・DMSO1%~0.1%
・β-eudesmol 1.25 μL, 2.5μL, 5.0μL

で「β-eudesmol添加 D-MEM培地 5mL」
を作りたいと思っています。

どなたかプロトコールわかる方、ご教授願います。。
 
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ありがとうございます 削除/引用
No.6156-9 - 2017/07/27 (木) 17:48:43 - マノラス
皆様、誠にありがとうございます。。。

(無題) 削除/引用
No.6156-8 - 2017/07/27 (木) 01:14:14 - おお
みなさんが書いていらっしゃるように、希釈倍率を計算すれば解決すると思いますし、それぐらいは自身でできると察しますが、なにかそれ以外に気がかりなことがあるのでしょうか?

普通に希釈 削除/引用
No.6156-7 - 2017/07/26 (水) 18:23:37 - ema
10mg/mL β-eudesmol DMSO溶液があり
0.5ul原液/1ml培地→5ug/ml溶液なので、2.5ul(原液)/5ml(培地)。
このときのDMSOは2000倍希釈なので0.05%です。どうしてもDMSO1%~0.1%にしたい場合はDMSOを必要量0.5ul〜9.5ul追加してください。
ピペットマンでとれる限界があるので、正確を期すなら
5ug/mlを倍に培地で希釈して2.5ug/ml溶液、2.5ug/ml溶液を倍に希釈して1.25ug/ml溶液を作成すれば良いのでは。
DMSO濃度にこだわるなら同様に追加してください。

(無題) 削除/引用
No.6156-6 - 2017/07/26 (水) 18:20:04 - AP
10 mg/mL eudesmolの溶液を
5.0 ug/mLにするには2000倍希釈
2.5 ug/mLにするには4000倍希釈
1.25 ug/mLにするには8000倍希釈
だね。だから5 mL D-MEMに対して、それぞれ5 mLの1/2000, 1/4000. 1/8000 vol.入れればいいので、2.5 uL, 1.25 uL, 0.625 uLと、「計算上は」なる。

しかし、そんな少量正確に測れないし、個々に測っても線形性もないので、
わたしなら

1) 10 uL eudesmol + 10 mL D-MEM →5 mLを使用 5 ug/mL

2) 5 mL(1) + 5 mL D-MEM →5 mLを使用 2.5 ug/mL

3) 5 mL(2) + 5 mL D-MEM →5 mLを使用 1.25 ug/5 mL

とするかな。あるいはあらかじめ eudesmolの二倍希釈列を作っておいて5 mL D-MEMに2.5 uLずつ入れる.

(無題) 削除/引用
No.6156-5 - 2017/07/26 (水) 17:25:26 - マノラス
申し訳ございません。。

DMSOに溶けている10mg/mL濃度のβ-eudesmol溶液があります。

そして、最終的に培地5mL中に添加したβ-eudesmolの終濃度が 1.25 , 2.5 , 5.0 μg/mL

に調整したいと思っています。。

(無題) 削除/引用
No.6156-4 - 2017/07/26 (水) 17:22:03 - マノラス
申し訳ございません。。

D-MEM培地に添加したβ-eudesmolの終濃度が 1.25 , 2.5 , 5.0 μg/mL

に調整したいと思っています。。

(無題) 削除/引用
No.6156-3 - 2017/07/26 (水) 17:03:02 - AP
>・DMSO1%~0.1%
って何の意味?

5 mL D-MEMに eudesmol 1.25, 2.5, 5.0 uLが入ったに相当する調製をすればいいわけですか?

1) 10 uL eudesmol + 10 mL D-MEM →5 mLを使用 5 uL/5 mL

2) 5 mL(1) + 5 mL D-MEM →5 mLを使用 2.5 uL/5 mL

3) 5 mL(2) + 5 mL D-MEM →5 mLを使用 1.25 uL/5 mL

(無題) 削除/引用
No.6156-2 - 2017/07/26 (水) 16:38:52 - mon
β-eudesmol 1.25 「μL」ってどういうこと?

試薬の同時希釈方法 削除/引用
No.6156-1 - 2017/07/26 (水) 16:33:37 - マノラス
化学実験で、希釈のことについて伺います。

今、10mg/mL β-eudesmol DMSO溶液があります。
これをD-MEM培地に含ませる際に

・DMSO1%~0.1%
・β-eudesmol 1.25 μL, 2.5μL, 5.0μL

で「β-eudesmol添加 D-MEM培地 5mL」
を作りたいと思っています。

どなたかプロトコールわかる方、ご教授願います。。

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