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PBMCさんへ 削除/引用 No.6815-3 - 2018/04/12 (木) 17:34:12 - PBMCさんへ 条件をすべての検体において統一してPBMCのアッセイは既報がいくつかあるようですよ。 �@抗原と72時間培養を行い、ELISPOT、 �A抗原と6時間培養を行い細胞内サイトカイン染色 サンプルの収集とマンパワーに限度があり、凍結したPBMCを使用することも理解できます。私は、インキュベート時間は�@は２４時間でもいいのでは、�Aの場合Brefeldin A で２４時間くらいに長くしたほうがよいと思います。 さらに、「凍結したPBMC使用」のご経験がある方、お願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.6815-2 - 2018/04/08 (日) 04:27:27 - う フレッシュのでやるべきですね。

凍結したPBMC使用について 削除/引用 No.6815-1 - 2018/04/05 (木) 17:49:00 - PBMC 臨床全血サンプルからフィコールを使用してPBMCを単離してマイナス80℃に保存して何例かストックしています。その条件をすべての検体において統一して、�@抗原と72時間培養を行い、ELISPOT、�A抗原と6時間培養を行い細胞内サイトカイン（CD4あるいはCD8に対するIFNγ）染色を行いたいと思います。コントロールは、同じ検体において抗原なしのものです。臨床サンプルの収集とマンパワーに限度があり、凍結したPBMCを使用するのですが、凍結していないPBMCと比較して、プロトコル・既報に関して留意すべき点をお聞きしたいと思います。インキュベート時間は�Aの場合もっと長くしたほうがよいと思いますが、それ以外にも「凍結したPBMC使用」のご経験がある方、宜しくお願いいたします。

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