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(無題) 削除/引用 No.9027-6 - 2020/07/20 (月) 15:37:06 - ぬけさく 皆様ありがとうございます。 ふらいむさんがご指摘いただいたとおり、ホルマリン系で固定すると全く抜けませんので、確実にアーティファクトです。核小体というレベルでなく、ごっそり真ん中が抜けてしまいます。 特別なサンプルを扱っているわけではなく、ありふれたマウスやヒトの腫瘍で起きています。 追加情報で、クライオスタットの設定温度を低めで薄切すると改善しました。低温設定でもささくれ立たず、ガリガリと異音もしないので、もしかして温度表示よりも実温度が高いのではと考えています。（ちょうど問題発生前にメンテナンスが入っていたので怪しんでいます） とはいえ、薄切温度で核の中央が抜けるというのはどうも腑に落ちません… 似たような経験をお持ちの方いらっしゃいますか？

(無題) 削除/引用 No.9027-5 - 2020/07/18 (土) 14:23:38 - ふらいむ アルコール固定だと組織の収縮が生じることはあります。 糸を引いているように見えるのはそのせいかもしれません。 可能なら他の固定法、例えばホルマリンか PFA固定を試してみてはいかがでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.9027-4 - 2020/07/18 (土) 06:07:59 - おお 具体的にどこの組織なのか開示できるならしたほうがいいと思いますがどうでしょう。

(無題) 削除/引用 No.9027-3 - 2020/07/18 (土) 03:56:16 - asd 核小体とか？

(無題) 削除/引用 No.9027-2 - 2020/07/18 (土) 00:55:57 - あsfghjk それってNetosisて言うやつだろ。細胞がクロマチン を吐き出す現象。その細胞が好中球とかマクロファージ以外だったら、そこそこいい仕事になるかも。

蛍光免染で核の中央が抜ける？ 削除/引用 No.9027-1 - 2020/07/17 (金) 14:35:51 - ぬけさく 凍結切片のIFでご指南いただけると幸甚です。 しばしばDAPI（核）の中央が抜けてリング状になってしまうことがあります。 核がリング状になるサンプルは、細胞が潰れ（剥がれ？）て糸を引いているように見える箇所も同時に見られるような印象です。 スライドに貼り付ける際や封入時に潰したのではとボスに指摘されましたが、注意して再チャレンジしても特に改善が見られません。また、物理的に潰したのなら中央が抜けるのも、よく考えるとおかしな話ですよね… 尚、サンプルは新鮮凍結切片（OCT包埋）をアルコール固定しています。 原因や改善方法をご存じの方がいらっしゃいましたら、ご指南いただけますと幸甚です。 よろしくお願いいたします。

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