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(無題) 削除/引用 No.9050-6 - 2020/08/04 (火) 12:33:09 - ゲルググ 某STAP細胞でGFPが光ってたから・・・ というのも、死にかけ細胞の自家蛍光だったような 顕微鏡の使い方で光ってもいないような細胞も光ってるように見える疑惑 気をつけよう

(無題) 削除/引用 No.9050-5 - 2020/08/04 (火) 00:51:09 - 通りすがり 　皆様ありがとうございました。 ＞どんだけ蛍光をエンハンスして見ているのですか？ 　Transfectionの効率が悪い細胞で、GFP＋のものがほとんど見つからないため、確かに、Exposure timeは長めになっています。 ＞つまり、Lipofectaimineの毒性で細胞が死にかけてるだけではないかな？ 　GFP+細胞がほとんど見られないことが過去の経験からあらかじめわかっていたので、Lipofectaminの量はレンジの真ん中から上限までを試しました。小さな顆粒状のものはともかく、細胞塊のような大きなものもありまして、おっしゃるとおり死んだ細胞の可能性はあると思います。（Lipofectaminの量を下げると意外にうまくいくのかもしれないですね。。。） ＞これ多分、製品説明書だと思うけど、自家蛍光について言及されていますね。 　ありがとうございます！自分で調べるべきところを代わりに調べてもらった形になり、若干恥ずかしいです。大変助かりました。

(無題) 削除/引用 No.9050-4 - 2020/08/03 (月) 16:27:08 - asan 通常赤色に近い部分にもかぶるような緑の自家蛍光は、細胞の死にかけで見えると言われてます。 つまり、Lipofectaimineの毒性で細胞が死にかけてるだけではないかな？

(無題) 削除/引用 No.9050-3 - 2020/08/03 (月) 14:48:17 - G25 これ多分、製品説明書だと思うけど、自家蛍光について言及されていますね。 ttps://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=&cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwjwpbWOqP7qAhUTH3AKHVCGBPsQFjADegQIBBAB&url=http%3A%2F%2Fciteseerx.ist.psu.edu%2Fviewdoc%2Fdownload%3Fdoi%3D10.1.1.630.7161%26rep%3Drep1%26type%3Dpdf&usg=AOvVaw3l1rnFnKoOoyILRFCU1seH 今はなきGibco BRLが出していたtechnical tips/methodology系の雑誌、Focusが引用されていますが、バックナンバーにアクセスするのは困難（ ちょっと前まではBRLの末裔のひとつである Ivitrogenのサイトかどっかで一部、閲覧できたのだけれどもThermoに吸収されてから切り捨てられたよう）。 代わりにこれなんかどうでしょ ttps://www.future-science.com/doi/10.2144/01312st02?url_ver=Z39.88-2003&rfr_id=ori%3Arid%3Acrossref.org&rfr_dat=cr_pub++0pubmed&

(無題) 削除/引用 No.9050-2 - 2020/08/03 (月) 13:27:15 - ゲルググ どんだけ蛍光をエンハンスして見ているのですか？

Lipofectamine 3000の自家蛍光 削除/引用 No.9050-1 - 2020/07/31 (金) 23:00:53 - 通りすがり 　基本的なことで恐縮ですが。。。 　Lipofactamine 3000使用後に細胞内のGFPを観察したいのですが、細胞が弱く緑に光るもの（小さい顆粒状のものから、大きめの塊まで）に囲まれていることに気づきました。赤いチャンネルでも同じものに蛍光が見られます。 　。。。Lipofactamineが自家蛍光を持つという理解でよろしいのでしょうか。ご教授いただけましたら幸いです。

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