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ELISAでのスタンダードカーブの必要性について トピック削除
No.9295-TOPIC - 2020/11/11 (水) 11:35:53 - ELISA
いつも参考にさせていただいています。
血中のあるタンパク質の量を、患者と正常コントロールで差があるか調べたいと考えています。
そのタンパク質の抗体(免疫染色用)は市販されているのですが、ELISAのキットなどは売られておらず、タンパク質も自分で作成しなければ入手はできなさそうです。
もしELISAのような系を市販の抗体を使用して作成を試みる場合、やはりスタンダードカーブを作成するための目的タンパク質の希釈系列は必須でしょうか?
スタンダードカーブがない場合でも、コントロールと患者血清で差があることを示すことは可能でしょうか?

素人質問で恐縮ですが、どなたかご意見、ご教示いただけますと幸いです。
できれば、その市販の抗体を用いた方法で血中での発現を調べたいと考えております。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.9295-5 - 2020/11/12 (木) 11:23:16 - おお
あと抗体をうっているメーカーによっては抗体を作ったときの抗原(特に大腸菌からのリコンビナント)をカタログに載せている場合があります。

(無題) 削除/引用
No.9295-4 - 2020/11/12 (木) 09:43:26 - おお
>タンパクは細菌由来
その細菌はてに入らないのですか?入るなら培養とかしてLysis液をポジコントして使うてはあるけど。

ありがとうございます 削除/引用
No.9295-3 - 2020/11/12 (木) 09:27:20 - ELISA
おおさま、ありがとうございます。
そのタンパクは細菌由来の物質なのですが、ペプチドなど何らかのポジコンになるものの作成が必要そうですね。

(無題) 削除/引用
No.9295-2 - 2020/11/11 (水) 11:41:06 - おお
少なくともポジコンとできればネガコンがいる。

ELISAでのスタンダードカーブの必要性について 削除/引用
No.9295-1 - 2020/11/11 (水) 11:35:53 - ELISA
いつも参考にさせていただいています。
血中のあるタンパク質の量を、患者と正常コントロールで差があるか調べたいと考えています。
そのタンパク質の抗体(免疫染色用)は市販されているのですが、ELISAのキットなどは売られておらず、タンパク質も自分で作成しなければ入手はできなさそうです。
もしELISAのような系を市販の抗体を使用して作成を試みる場合、やはりスタンダードカーブを作成するための目的タンパク質の希釈系列は必須でしょうか?
スタンダードカーブがない場合でも、コントロールと患者血清で差があることを示すことは可能でしょうか?

素人質問で恐縮ですが、どなたかご意見、ご教示いただけますと幸いです。
できれば、その市販の抗体を用いた方法で血中での発現を調べたいと考えております。
よろしくお願いします。

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