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ダイレクトシーケンス 削除/引用 No.10564-8 - 2022/06/21 (火) 16:09:08 - akiboooooo プラスミドを取らないで、コロニーダイレクトPCRして、 それをダイレクトシーケンスすれば1日早く結果がでます。

(無題) 削除/引用 No.10564-7 - 2022/06/21 (火) 15:41:13 - seventh そもそも何を目的としてます？

(無題) 削除/引用 No.10564-6 - 2022/06/21 (火) 15:39:47 - が 私もoriciroに一票。コスト度外視ですが、時間を買うと思うと良いのでは

(無題) 削除/引用 No.10564-5 - 2022/06/21 (火) 15:35:45 - AA 朝8時か9時くらいに播ければ帰りギリギリにはコロニーが拾えるので2日で終わらせられます。 コロニー拾うだけで1日潰れている部分が結局ネックだと思いますのでこれが一番短縮できると思います。 ただ、これは個人的経験則ですが時間に追われて焦って作ったときほどうまくいかないので、なにかの片手間にのんびりやるのが結局一番だと思っています。 (前週に構築したプラスミドで実験しつつ合間で次のプラスミド構築、など)

(無題) 削除/引用 No.10564-4 - 2022/06/21 (火) 12:43:26 - 利害無関係者 こんなのは？ https://oriciro.wixsite.com/oriciro-jp

(無題) 削除/引用 No.10564-3 - 2022/06/20 (月) 20:27:54 - おお >[Re:1] E.coliさんは書きました > > 例えば、超早くコロニーを形成する大腸菌があれば Day1でコロニーをピックアップできますが。 > > 実際そうしている人がいました。

(無題) 削除/引用 No.10564-2 - 2022/06/20 (月) 18:19:23 - み Day2 朝コロニーピック　夕方ミニプレでしょう さすがにトラフォメのコロニー形成は12時間はかかる。

超高速でクローニングするには？ 削除/引用 No.10564-1 - 2022/06/20 (月) 18:14:06 - E.coli クローニングをする際にいつももっと早くクローニングできないのかなと思ってます。 よく行っている方法では Day1 1. RNAからcDNA作製 2. プラスミドへクローニング（Gibson 15min） 3. 大腸菌をトランスフォーメーション Day2 4. コロニーをピックアップ Day3 5. ミニプレをしてシークエンス となります。 3-5が律速段階となりますが、3-5のステップを短縮できる方法などはないですか？ 例えば、超早くコロニーを形成する大腸菌があれば Day1でコロニーをピックアップできますが。

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