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(無題) 削除/引用 No.7459-7 - 2018/12/07 (金) 14:59:28 - 学部4年 おおさん そうですよね、、 なにか任意のアミノ酸に標識できる方法など、私の知らない方法があればと思い質問させていただきました。 ご助言ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.7459-6 - 2018/12/07 (金) 14:57:04 - 学部4年 PYKさん、院 拓人さん 目的タンパク質は1アミノ酸変異を加えただけでも機能を失う可能性があり、タグの付加は避けたいと考えています。

(無題) 削除/引用 No.7459-5 - 2018/12/07 (金) 14:29:04 - 中年 状況がよくわからないのですが、その2種類のタンパク質を区別できないものの抗体はあるという前提なのですね？ 生存に必須のタンパク質でなければ、一方ずつノックアウトかノックダウンして染色像の変化を観ることは？間接的な証拠ではありますが。

(無題) 削除/引用 No.7459-4 - 2018/12/07 (金) 11:45:55 - おお 結局それぞれのタンパク質に特異的に相互作用するものを（ケミカルにしろ、ライガンドにしろ、）探すしかないと思いますけど。

(無題) 削除/引用 No.7459-3 - 2018/12/07 (金) 11:06:34 - 院 拓人 タグは使いたくないというのが条件なのでは？

(無題) 削除/引用 No.7459-2 - 2018/12/07 (金) 11:00:51 - PYK まあ、一番無難でコストが抑えられる方法は、CRISPRなどで目的の遺伝子の前後にタグ配列を付加させることですかね。多少時間はかかりますが、intactな局在をタグ抗体で観察できます。

類似タンパク質の識別 削除/引用 No.7459-1 - 2018/12/06 (木) 23:03:54 - 学部4年 初めまして。いつも参考にさせていただいております。 現在、ある細胞に発現している2種類のタンパク質(お互いのアミノ酸配列の相同性が90%程度)の局在を観察しようと考えているのですが、どのように観察すればよいか迷っており、質問させていただきます。 ・2種類のタンパク質は細胞表層に存在する(と考えられる)タンパク質で、 互いのアミノ酸配列の相同性が90%程度です。 ・蛍光タンパク質やHisタグなどの付加をせずに、よりintactな状態での局在を観察したいです。 ・ペプチド抗体等を用いた染め分けは検討項目にあるのですが、コストがかかるため出来るだけコストを抑えられたらと考えています。 以上のような状況なのですが、なにか良い観察、識別方法があればご教授いただけると幸いです。 よろしくお願い致します。

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