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(無題) 削除/引用 No.1537-3 - 2013/03/12 (火) 20:23:56 - ありゃ APさんの方法では、できないと思うのは当方だけでしょうか。 読み違っているかもしれないけど、変な２本鎖がそれぞれにできるだけと読める。

(無題) 削除/引用 No.1537-2 - 2013/03/12 (火) 19:34:00 - AP まず、断片Aに対して、プライマーAfとA-Br (f: forward; r: reverse)でPCR、 断片Bに対して、プライマーA-BfとBr (f: forward; r: reverse)でPCRかけ、 これらのPCR産物を精製（ゲル切りだしで、プライマーや副産物を除去）する。 次に、PCR産物AとBを適当量混合し、プライマーAfとBrを加えてPCRする。 で、できると思います。

PCRで２つのフラグメントをつなぐときは 削除/引用 No.1537-1 - 2013/03/12 (火) 18:54:49 - 学生 お世話になります。 周囲に詳しい人がいないのでご相談させてください。 AとBの異なるDNAフラグメントを、A-BというふうにPCRで繋ごうとしています。 この場合、 AとBのテンプレート、 AのFoward、 BのReverse、 A+Bの両フラグメントにまたがったプライマー、FとR があればよいのかと思ったのですが、この方法でＰＣＲしてよいのでしょうか。 両フラグメントにまたがった部分が繋がらず、繋がったものが取れないような気もします。 間違っている場合は、どのように設計すればよいでしょうか。

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