Bio Technical フォーラム

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(無題) 削除/引用
No.6247-2 - 2017/08/25 (金) 17:30:09 - おお
扱っているアミロイドの性質にもよるでしょうけど、アミロイド形成の初期はそんなに多くの分子が凝集しているわけでないので、溶液のように使えるかもしれないなとも思うのですがどうでしょうか。

また、プリオンでは超音波で小さい単位のものにして、それをコアにしてプリオンを成長させる蛋白のPCRが開発されています。超音波で扱いやすい大きさにできないかなぁと。。。

アミロイド状でない蛋白を固相化して、固相化後にアミロイドを作ることができないかなとも思うのですが、方法論もですが、アミロイド化したのをどのように検証したらいいのか、、、thioflavin Tとかで染めればわかるか。。。

アミロイドを溶かしたい 削除/引用
No.6247-1 - 2017/08/25 (金) 17:11:35 - アミロイド
最近、自分が扱っているタンパク質がアミロイドを形成することが報告されました。そこで、そのタンパク質に対する抗体（立体構造を認識するヒト血清）がアミロイド状になったものにも反応するかを調べたいと考えています。これをELISAで確認したいのですが、アミロイドなので不溶化してしまい、固相化ができません。なんとか溶かしてやりたいのですが、変性剤を使ってしまうと、ポジコンであるアミロイドを形成していないものの立体構造が壊れてしたまい、ポジコンの反応が無くなってしまいます。どのようにアミロイドを可溶化すれば良いでしょうか。または、ELISA以外の方法でこの抗体の反応性を調べることはできないでしょうか。
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